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天冬酰胺合成酶(AS)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 66
更新时间: 2022-05-24
描述:天冬酰胺合成酶(AS)测试盒微量法公司正在出售的产品:沙氏葡萄糖琼脂(含氯) 英文名称:Sabouraud-glucose Agar with Chloramphenicol 产品规格:250g 酪蛋白葡萄糖肉汤 英文名称:Sabouraud-dextrose Broth 产品规格:250g 大豆胨酵母浸粉琼脂(PYE) 英文名称:Phytone Yeast Extract Agar 产品规格:2

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6512

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:天冬酰胺合成酶(AS)测试盒微量法

产品规格:100管/96样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6512

产品分类:氨基酸代谢系列
商品介绍:

测定意义:

天冬酰胺合成酶是广泛存在于生物体内的一类氨基转移酶,催化谷氨酞胺的氨基向天冬转移。当植物处于氨毒时天冬酞胺的形成是一种解毒反应。测定原理:

AS催化L-天冬酰胺水解成L-天冬和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。

需自备仪器和用品:

台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵、冰和双蒸水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

1瓶 A2细胞株 A2 低温运输和保存

1台 分子杂交炉 Hybridization Oven 常温

100次 总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法) Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

DNA甲基绿琼脂基础 Dnase Agar Base with Methyl Green 100

100次 真菌种属鉴定 PCR Mix 5(RPB1) Fungal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

2 ug pALEX b pALEX b 低温运输,-20℃保存

氧化胺培养基 TMAO Medium 250g

1瓶 Saos-2细胞株 Saos-2 低温运输和保存

胰蛋白胨大豆肉汤  250g

1g 二乙酸荧光素 Fluorescein Diacetate -20℃避光保存

50T 创伤弧菌PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

天冬酰胺合成酶(AS)测试盒微量法MBNL3  毒蕈碱样蛋白3抗体 规格: 0.2mlNGN3/Neurogenin 3  神经元素3抗体 规格: 0.1ml

phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596)  磷酸化内皮细胞受体蛋白酪激A2+A3+A4抗体 规格: 0.1mlGPR65  G蛋白偶联受体65抗体 规格: 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/RBITC  罗丹明标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

BrdU  溴脱氧尿苷抗体 规格: 0.1ml

OCIAD1  卵巢免疫反应抗原抗体 规格: 0.2ml

Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7)  磷酸化热休克蛋白90α抗体 规格: 0.1ml

RAB21  G蛋白家族RAB21蛋白抗体 规格: 0.2ml

PCDH8  原钙粘附蛋白8抗体 规格: 0.2ml

phospho-Tau protein(Ser356)  磷酸化微管相关蛋白抗体 规格: 0.1ml

LTB4-R1/BLTR  白三烯B4受体1抗体 规格: 0.1ml

DPEP3  膜二肽3抗体 规格: 0.2ml

TFDP3  转录因子DP3抗体(肝相关抗原661) 规格: 0.2ml 

 


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