免疫组化阴性对照的组织选择其实有明确的黄金法则:基因敲除样本,没有的话就用天然低表达组织。具体帮你整理好了:
一、方案:基因敲除样本
操作:用基因敲除(KO)或敲低(KD)的组织,比如CD4检测用CD4-KO小鼠
优势:结果,能直接排除抗体交叉反应
二、备选方案:天然低表达组织
操作:查Human Protein Atlas找目标蛋白低表达的组织
示例:PD-L1检测用正常肺组织
三、关键操作要点
同步处理:和实验组用同一批固定液、同种修复方法
验证:若阴性对照显色,可能是抗体交叉反应或封闭不充分
记录:标注组织来源和处理条件,方便追溯
四、常见问题
假阳性:阴性对照显色→排查抗体特异性或封闭步骤
假阴性:阴性对照未显色→检查抗体效价或显色试剂
联系我们
上海帛科生物技术有限公司 公司地址:上海嘉定区嘉罗公路1661 号24栋 技术支持:环保在线扫一扫 更多精彩
微信二维码
网站二维码