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柠檬酸(CA)含量测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 127
更新时间: 2022-05-24
描述:柠檬酸(CA)含量测试盒微量法公司正在出售的产品:改良克氏双糖铁培养基管 英文名称: 产品规格:5ml*20支 改良Y平板 英文名称: 产品规格:9cm*10个 小肠结肠炎耶尔森氏菌成套生化鉴定管 英文名称: 产品规格:10种*2套/盒*5盒 改良番茄汁培养基 英文名称:Tomato Juice Agar,Modified 产品规格:250g

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6573

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

柠檬酸(CA)含量测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6573

商品介绍:

测定意义:

CA又称枸橼酸,广泛存在于各种生物胞质中,是生物体内重要的有机酸。CA也存在于线粒体基质中,是三羧酸循环步反应的产物,与脂肪、蛋白质和糖最终转化为二氧化碳密切相关。

测定原理

酸性条件下,柠檬酸可将Cr6+还原成Cr3+,在545nm处有特征吸收峰;通过测定545nm吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。

实验中所需仪器及设备

可见分光光度计、低温离心机、掌上离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

10g D- 氨基葡萄糖盐酸盐 D-Glucosamine Hydrochloride  室温干燥保存

50T O139CR检测试剂盒   低温运输,-20℃保存

100 mL D/F12培养基(含10%胎牛血清) Cell Culture Medium -20℃保存

2 ug pBiFC-VN173 pBiFC-VN173 低温运输,-20℃保存

10mL TE缓冲液,PH7.5  

2 ug pX459 pX459 低温运输,-20℃保存

营养肉汤培养基(中国药典)  250g

1瓶 C-33 A [C33A]细胞株 C-33 A [C33A] 低温运输和保存

茜素-β-半乳糖苷琼脂(Aliz-gal琼脂) Aliz-gal Agar 100g

100U Klenow 片段  

5mL Phosphatase Inhibitors Cocktail-I  Phosphatase Inhibitors Cocktail-I  常温保存

柠檬酸(CA)含量测试盒微量法C1orf125  1号染色体开放阅读框125抗体 规格: 0.2ml

SDCCAG10  结肠抗原10抗体 规格: 0.2ml

Gibberellins  牛磺酸/β-氨基乙磺酸抗体 0.1ml

GNG2  G蛋白γ2抗体/核苷酸结合蛋白γ2抗体 规格: 0.2mlCKLFSF2/CMTM2  趋化素样因子超家族成员2抗体 规格: 0.2ml

SCYL1BP1  SCYL结合蛋白1抗体 规格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/Cy5.5  Cy5.5标记的羊抗兔IgG 规格: 0.1ml

MAGEL2  黑色素瘤抗原样基因2抗体 规格: 0.2mlphospho-c-Raf(Ser494)  磷酸化原基因c-Raf抗体 规格: 0.1ml

Histone H3  组蛋白H3抗体 规格: 0.1mlAPOB48R  载脂蛋白B受体抗体 规格: 0.2ml

TPP1/CLN2  细胞生抑制基因1蛋白抗体 规格: 0.2mlphospho-CD151/MER2(Ser30)  磷酸化CD151抗体 规格: 0.1ml

Phospho-PDGFRA(Tyr572)  磷酸化小板源性生因子受体α 规格: 0.1mlNHEDC2  线粒体钠/交换蛋白质2抗体 规格: 0.2ml

Integrin alpha 3/CD49c  整合素α3抗体 规格: 0.1mlPhospho-PNK1 (Ser114/Thr118)  磷酸化多聚合苷酸激3磷酸化抗体 规格: 0.1ml

IKK alpha + IKK beta  KB抑制蛋白激α/β抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗水貂IgG 规格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/Gold  胶体金标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 规格: 0.5mlMyosin heavy chain 1  肌球蛋白重链抗体 规格: 0.2ml

 


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