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产品名称:

糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 96
更新时间: 2022-05-31
描述:糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒微量法公司正在出售的产品:布氏琼脂进口、国产Brucella Agar250克弯曲杆菌的抗生素敏感性试验和纯化培养布氏肉汤进口、国产Brucella Broth250克用于弯曲杆菌增菌肉汤和布氏琼脂的制备红四氮唑沙保罗进口、国产TTC-Sabourand,s Medium250克用于分离真菌,酵母菌等三苯四唑琼脂基础进口、国产TTC Agar Base250克弯曲杆菌

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6984

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒微量法

产品规格:100管/48样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6984

产品分类:糖原系列
商品介绍:

测定意义:

糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylaseGPEC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-14-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-16-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶aGPa)和无活性的糖原磷酸化酶bGPb)两种形式。GPb在一定浓度的腺苷酸(5-AMP)存在下可被激活。

测定原理:

GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定浓度的腺苷酸(5-AMP)时测定GPGPaGPb)活性,未添加腺苷酸(5-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

2 ug pBKS pBKS 低温运输,-20℃保存

100mL DNEDTA溶液,0.5M,PH8.01   

2 ug pFastBac-Dual pFastBac-Dual 低温运输,-20℃保存

硫乙醇酸盐流体(颗粒)  250g

1瓶 Ca759细胞株 Ca759 低温运输和保存

细菌总数显色 Total Genes Chromogenic Medium 250g

100U Sulfolobus DNA 聚合 IV Sulfolobus DNA Polymerase IV -20℃保存

强化梭菌(RCM) Reinforced Clostridium Medium 250g

200mL 自诱导液体(arab启动子)  

2 ug pOG2-cre pOG2-cre 低温运输,-20℃保存

NT NT Medium 250g

糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒微量法TSPAN12/NET-2  四分子交联体12抗体(四旋蛋白) 规格: 0.2ml

FLT-3/CD135  FMS样酪激3 规格: 0.2ml

DLK1/Delta/DLL1 (C-terminus)  穿膜蛋白DLK1抗体(C端) 0.1ml

WIF1  Wnt信号抑制因子1抗体 规格: 0.2ml

Goat Anti-human IgG/Cy3  Cy3标记的羊抗人IgG 规格: 0.1ml

Cyclin L/CCNL1  周期素L抗体 规格: 0.2ml

PLK4/STK18  丝/苏蛋白激18 规格: 0.2ml

C15orf41  15号染色体开放阅读框41抗体 规格: 0.2ml

Phospho-PLC gamma 1 (Tyr771)  磷酸化磷酯Cγ1抗体 规格: 0.1ml

EDNRB  内皮素受体B抗体 规格: 0.1ml

phospho-Syntaxin 1a(Ser14)  磷酸化突触融合蛋白1抗体 规格: 0.1ml

NGAL/Lipocalin 2  脂质运载蛋白抗体 规格: 0.1ml 

 


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