猪瘟病毒疫苗株染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

注意事项：产品仅用于科研1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
产品名称：猪瘟病毒疫苗株染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 
规格： 50次
货号：BK-P97058
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

特点优势：
   1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
   2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
   3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
   4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
   6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

荧光定量PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
血红素，高铁血红素；羟基血红素  Hematin  分子式： C34H33FeN4O5     分子量：633.50

蕈青霉素;Paxilline  Paxilline*, from Penicillium paxilli  分子式：C27H33NO4  分子量：435.56

亚甲紫3RAX(>90%，BS)  Methylene violet 3RAX  分子式：C22H23ClN4      分子量：378.90

亚精胺0酸盐  Spermidine phosphate salt hexahydrat
酵母浸粉；酵母粉  Yeast extract  物理性状及指标：  色泽：……………………浅棕色

马铃薯葡萄糖水  Potato Dextrose Water  用法：称取本品  26.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15分钟,备用。  用途及描述：科研试剂，用于椰毒假单胞酵米面亚种和真菌的增菌培养。

麦芽浸膏  Malt Extract  用途及描述：科研试剂，微生物培养基  储存条件：18~25°C，避光防潮密闭干燥。

明胶  Gelatin  分子式：    分子量：  物理性状及指标：

脑心浸出液肉汤（BHI）颗粒  BHI Broth  产品介绍  用途:营养丰富,用于培养各种细菌。
脂酶，英文名或英文缩写：Lipase(pocine pancreas)，级别：生物技术级，0.5u/mg，规格：5克  人胸苷酸合成酶(TS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

554-12-1metxyl propionate;  猪凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫试剂盒 Pig coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit

L-Lactide乳酸1克CP，70%  HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor,BAFF-RELISAKit 人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

顺二酰 3,6-Dixy7noxypyridczinq 13-33-1  Humanmelanocytestimulatinghormone,MSHELISA试剂盒人黑色素细胞刺激素(MSH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L--GlucoseL-(-)-无水葡萄糖2×0.25毫升BR，95%  组织(NO)活性比色法定量检测试剂盒50次
猪瘟病毒疫苗株染料法荧光定量RT-PCR试剂盒一氧化硅shēng huà shì jì容量：25克  组织苹果酸脱氢酶(MDH)活性比色法定量检测试剂盒20次

2687-91-4N-乙基-4-1完酮 (NEP)N-etxyl-2-pyrrolidone  HumanImmuneRNA,IrnaELISAKit人免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒规格：96T/48T

GOLD-N-GELRNADYE,200X12.5mlRT  人血小板相关抗体IgM(PA-IgM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

溴代三(二甲基基)...