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注意事项:产品仅用于科研1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称:RNase-Free Phosphate Buffered Saline
规格: 详见说明
货号:BK-P96654
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(最好用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
荧光定量PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
环沙星 Ciprofloxacin (HPLC,≥98.0%) 85721-33-1 5G 通用试剂 小鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-13 ELISA Kit
无活菌素Nonactin质量规格:>98%,美国进口 鱼类受精卵细胞冻存试剂盒(低温)50 大肠杆菌(O157:H7)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
曲古柳菌素ATrichostatin A from Streptomyces sp质量规格:>98%,进分 MouseInsulin,INSELISAKit小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒规格:96T/48T HumanSc1-70Aibody,Sc1-70-AbELISA试剂盒人抗Sc1-70抗体(Sc1-70-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
罗布麻宁;夹竹桃麻素(标准品)Acetovanillone质量规格:GC>98%,标准品 小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒 ,英文名: VEGF ELISA Kit ELISAKitANG-1小鼠血管生成素1规格:48T/96T
罗布麻宁;夹竹桃麻素Acetovanillone质量规格:>98%,BR 小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA检测试剂盒MouseApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 96T/48T Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISAKit人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
牛磺胆酸钠质量规格:>97%,BRTaurocholic acid Salt Rat glycated hemoglobin A1c (A1c) ELISA Kit 大鼠糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒 细胞CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20
诺米林(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Nomilin HumanFreeThyroxine,FT4ELISAKit 人游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 ELISAKitD2R大鼠多巴胺D2受体规格:48T/96T
欧当归内酯A(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Levistilide A HumancoagulationfactorⅡ,FⅡELISA试剂盒人凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 大鼠血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)ELISA试剂盒 ,英文名: vWF-cp ELISA Kit
人参皂苷Rh3(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Ginsenoside Rh3 组蛋白脱乙酰化酶5(HDAC5)活性比色法定量检测试剂盒20 人抗呼吸道合胞病毒抗体(RSV)ELISA检测试剂盒Humanai-respiratorysyncytialvirusaibody,RSVELISAKit 96T/48T
RNase-Free Phosphate Buffered Saline3-基-2--1-醇 3-Mqthyl-2-butqn-1-ol 226-8-1 大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫试剂盒 Rat maix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit
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