如何判断Anti-ACA11蛋白降解程度

判断Anti-ACA11蛋白降解程度，可通过‌「外观初筛→内参验证→靶标信号比对」‌三步精准判定，结果对应清晰的降解等级：

第一步：外观快速初筛

先观察蛋白样本的状态，初步划分等级：

‌正常无降解‌：蛋白溶液澄清透明，无浑浊、沉淀或絮状物

‌可疑降解‌：溶液轻微浑浊，无明显沉淀

‌明确重度降解‌：出现明显沉淀、絮状物，溶液分层

第二步：内参WB验证（核心判定依据）

将待测样本和‌新鲜提取的同来源正常样本‌同时跑WB，检测拟南芥管家基因内参（Actin/UBQ，约40kDa）

第三步：结合Anti-ACA11靶标信号确认

因为ACA11是低丰度膜蛋白，比内参更易降解，需要补充靶标结果修正判定：

内参正常，但ACA11信号比新鲜样本下降超过50%：判定为轻度-中度降解

内参正常，但ACA11无信号：判定为中度降解

内参已经模糊弥散，ACA11无信号：直接判定为重度降解