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蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 184
更新时间: 2022-05-20
描述:蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法辅酶Ⅱ系列公司正在出售的产品:3%氯化钠碱性蛋白胨水 英文名称:3%Sodium Chloride Peptone Water 产品规格:9ml*20支/包 0.85%无菌生理盐水(9ml/支) 英文名称:0.85% Sterile Saline 产品规格:9ml*20支/包 0.85%无菌生理盐水(10ml/支) 英文名称:0.85% Sterile Sa

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6368

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法

产品规格:50管/48样

检测方法:紫外分光光度法

产品货号:BK-01S6368

产品分类:辅酶Ⅱ系列
商品介绍:

测定意义:

SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷键,催化葡萄糖基转移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相应的葡萄糖基低聚糖。此外,SP还能催化合成熊果苷,具有的美白效果,在化妆品工业中具有重要应用。

测定原理:

SP能够以磷酸为受体,催化蔗糖产生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸变位酶催化下变位为6-磷酸葡萄糖,在6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下还原NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。测定340nm吸光度增加速率,即可计算SP活性。

自备实验用品及仪器:

天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、1mL石英比色皿和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

1瓶 PA317细胞株 PA317 低温运输和保存

兔血浆 Rabbit plasma 0.5ml*10

50g 酪蛋白 Casein From Bovine Milk 室温干燥保存

500mL Wash Buffer  Wash Buffer  常温保存

100U 二酯Ⅰ Phosphodiesterase I -20℃保存

2 ug pUSE (Amp) pUSE (Amp) 低温运输,-20℃保存

50次 柱式海洋动物DNAout Column Marine Animal DNAOUT 常温

2 ug p3×FLAG-CMV-8 p3×FLAG-CMV-8 低温运输,-20℃保存

乳酸杆菌选择性培养基 LBS Agar 250g

25g  1:250 Trypsin 1:250 Porcine Pancreas 4℃保存

50T 猪脑心肌炎病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法Integrin beta 6  整合素β6抗体(Integrin β6) 0.2mlAdenylate Kinase 1/AK1  苷酸激-1抗体 规格: 0.2ml

LAMP-3/DC-LAMP/CD208  溶体相关膜蛋白3抗体 规格: 0.1mlPhospho-HER3(Tyr1328)  磷酸化HER3受体抗体 规格: 0.1ml

Exendin 4  GLP1类似蛋白Exendin4抗体 规格: 0.1mlphospho-LSP1 (Ser204)  磷酸化白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体 规格: 0.1ml

Goat Anti-Bovine IgG/Cy7  Cy7标记的羊抗牛IgG 规格: 0.1mlCR1/CD35  Ⅰ型补体受体抗体(C3b/C4b受体抗体) 规格: 0.1ml

KLHL36/C16orf44  Kelch样蛋白36抗体 规格: 0.2mlCASC5  瘤易性候选基因5抗体 规格: 0.2ml

GABRA1  G1氨基丁酸A型受体α1抗体 规格: 0.1mlTIMP-2  金属蛋白组织抑制因子-2抗体 规格: 0.1ml

phospho-APE(Ser1417)  磷酸化肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体 规格: 0.1mlDC-SIGN/CD209  细胞间粘附分子非整合素蛋白3抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgM/HRP  辣根过氧化物标记的兔抗大鼠IgM 规格: 0.1mlPLGLB2  纤溶相关蛋白B2抗体 规格: 0.2ml

Cdc7  细胞分裂周期蛋白7抗体 规格: 0.1mlAKT3  蛋白激B3 规格: 0.1ml

HSPBAP1  热休克蛋白27相关蛋白1抗体 规格: 0.2mlGRM2/GLUR2  促代谢型谷受体2抗体 规格: 0.1ml

TTC23  宫颈原基因8抗体 规格: 0.2mlCytokeratin 13/CK-HMW  高分子量细胞角蛋白抗体 规格: 0.1ml

RIT1  RIT1蛋白抗体 规格: 0.2mlTPSB2  肥大细胞类胰蛋白β2 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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