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ATP含量测试盒可见分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 151
更新时间: 2022-05-24
描述:ATP含量测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:产芽孢肉汤 英文名称:Sporulation Broth 产品规格:250g B(1.2mg) 英文名称:Polymyxin B 产品规格:1.2mg/支*5 多价蛋白胨-酵母膏(PY)培养基 英文名称:Poly Peptone Yeast Extract Medium 产品规格:250g 疱肉培养基基础 英文名称:Cooked Meat Medi

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6549

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

ATP含量测试盒可见分光光度法

50管/24样

可见分光光度法

BK-01S6549

商品介绍:

测定意义:

ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。

测定原理:

肌酸激酶催化肌酸和ATP反应生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量,以此反应ATP含量。

自备仪器和用品:

分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

50T 人白血病Major-BCR-ABL融合基因PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

20 μL Ac-IETD-FMK(Caspase 8 Inhibitor) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

50mL Chaps Lysis Buffer  Chaps Lysis Buffer  常温保存

5mL 成骨细胞生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

2 ug pHIL-S1 pHIL-S1 低温运输,-20℃保存

克氏双糖铁琼脂 Kligler Iron Agar 250g

1瓶 HuTu-80细胞株 HuTu-80 低温运输和保存

平板计数琼脂(含麦芽提取物) Plate Count Agar 250g

100mg 碱性标记亲和素 AP-Avidin -20℃保存

250mL Sodium Carbonate Solution(钠溶液),0.5M,pH9.4   Sodium Carbonate Solution,0.5M,pH9.4   常温保存

1 管 0F大肠杆菌 0F’E.coli Strain -80℃保存

ATP含量测试盒可见分光光度法DSN1  着丝粒相关蛋白DSN1抗体 规格: 0.2mlACADL  酰基辅A脱链抗体 0.1ml

ELAVL3/HuC  副瘤综合症小脑变性相关蛋白抗体 规格: 0.1mlGoat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的羊抗牛IgG 规格: 0.1ml

DRAK2  DAP凋亡诱导蛋白激2抗体 规格: 0.2mlUBR7/C14orf130  14号染色体开放阅读框130抗体 规格: 0.2ml

BLNK  B淋巴细胞连接蛋白抗体 规格: 0.1mlPhospho-PLC gamma 2 (Tyr759)  磷酸化磷酯Cγ2抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗抗体IgG 规格: 0.1mlPhospho-Paxillin(Tyr88)  磷酸化桩蛋白Paxillin抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-pig IgG/APC  APC标记的兔抗猪IgG 规格: 0.1mlIL-2  白介素2抗体(大、小鼠) 规格: 0.2ml

Bak  Bcl-2同源拮抗剂抗体 规格: 0.1mlMouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的小鼠抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

Desmoglein 3/DSG3  桥粒芯蛋白3抗体 规格: 0.1mlRabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗小鼠k链 规格: 0.1ml

c-Maf  原基因cMAF抗体 规格: 0.2mlV5 tag  V5 tag标签抗体 规格: 0.1ml

Phospho-CHK2 (ser19)  磷酸化细胞周期检测点激2抗体 规格: 0.1mlSERPING1/C1 Inactivator  酯抑制蛋白C1IN抗体 规格: 0.2ml

Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412)  磷酸化β抑制蛋白1抗体 规格: 0.1mlTBX18  转录因子Tbx18抗体 规格: 0.2ml

CCDC47  卷曲螺旋结构域蛋白47抗体 规格: 0.2mlPhospho-NPM (Ser4)  磷酸化核仁磷酸蛋白抗体 规格: 0.1ml

 


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