Western Blot检测试剂盒

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
GDF15 Protein Human 重组人 GDF-15 蛋白 (Fc 标签)盐酸特拉唑嗪（标准品）质量规格：含量测定Terazosin HCl

人肝窦内皮细胞 (HHSEC) ( 5×105 ) 大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) Rattus氯化钠（标准品）质量规格：含量测定 chloride

小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]氨力农（标准品）质量规格：UV法含量测定Amrinone

SERPINB3 Others Human 人 SerpinB3 / SCCA-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 更昔洛韦（标准品）质量规格：含量测定Ganciclovir

CM-R102大鼠脑静脉血管内皮细胞*培养基100mL反式玉米素葡萄糖苷质量规格：美国进口trans-Zeatin glucoside
ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACIIB / ACVR2B 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸环丙孕酮(标准品)质量规格：含量测定Cyproterone acetate

大额牛肾细胞;BFR-K1甲地孕酮质量规格：>98.5%,BRMegestrol base

人肾系膜细胞 (HRMC)(1×106 )烟酸乙酯(>98%,BR)质量规格：>98%,BREthyl nicotinate

CL-0179P19(小鼠畸胎瘤细胞)5×106cells/瓶×2二茂铁质量规格：>98%Ferrocene

人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T] 大鼠雪旺氏细胞*培养基 100mL反苯环丙胺盐酸盐；单胺氧化酶(MAO)抑制剂质量规格：>97%,单胺氧化酶(MAO)抑制剂Tranylcypromine (2-PCPA) HCl
人表皮角质细胞RNAHEK miRNA5 μg羟胺溶液100克

ACO1 Others Human 人 ACO1 / irp1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 本加醋胆酯 Cholqstqryl bqnzoctq 604-3-0

兔间变表皮鳞癌瘤株;VX23-异丁基-1-黄... 3-Isobutyl-1-methylxanthine (≥99%, IB... 28822-58-4 100MG 通用试剂

BxPC-3细胞，原位胰腺腺癌细胞 鼠骨髓瘤细胞,P3X63-Ag8.653细胞 人食管癌细胞;EC109放现菌肉汤培养基支RT

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1(鱼精DNA)
Western Blot检测试剂盒Promocell C-22020 Endothelial Cell GrowthMedium MV, 内皮细胞生长培养基MV(即用型) 500ml链脲佐菌素（标准品）Streptozocin质量规格：HPLC>98%,标准品

人食道上皮细胞裂解物HEEpiCL硝酸硫康唑Sulconazle Nitrate质量规格：>98.0%,JP2002

HEXA Others Human 人 Hexosaminidase A / HEXA Subunit A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 硝酸硫康唑(标准品)Sulconazle Nitrate质量规格：HPLC>98%,标准品

人结直肠腺癌细胞;HCT-15 [HCT15]舒尼替尼碱Sunitinib base质量规格：>98.5%

Acc-2细胞，涎腺腺样囊性癌细胞 人胃腺癌细胞,MGC-803细胞 兔晶体上皮细胞永生系;N/N1003A(RLE)舒尼替尼碱（标准品）Sunitinib base质量规格：HPLC>98%,标准品
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。