显色法，通用型

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人细胞裂解液 (阳性对照) 偏钒酸银(>98%,BR)质量规格：>98%,BRSilver metavanadate

人成纤维细胞*培养基 100mL银粉（200目）(>99.5%,EP)质量规格：>99.5%,EPSilver powder

HS-4细胞，人皮肤癌细胞系 鼠伤寒沙门氏菌Ta97 杂交瘤(B类);Z172A4C4C6F3G125-硝基愈创木酚钠(>98%,BR)质量规格：>98%,BR 5-nitroguaiacolate

XCL1 Protein Canine 重组狗 XCL1 蛋白 (His 标签)苯亚磺酸钠(>98%,BR)质量规格：>98%,BR benzenesulfinate

ME-180(人颈表皮癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 人细胞裂解液 (阳性对照) 氯化血红素;血晶素质量规格：0.98Hemin
仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C111酸氢钙二水(>98%,BR)质量规格：>98%,BRCalcium phosphate, dibasic, dihydrate

XCL2 Others Human 人 XCL2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 碳酸铈质量规格：>99.9%,ARCerium(III) carbonate, hydrate

CM-R118大鼠虹膜色素上皮细胞*培养基100mL文多灵质量规格：>98%,BRVindoline

HNE2, 人鼻咽癌细胞系 NIH SWISS小鼠胚细胞,NIH3T3细胞 A673(横纹肌瘤细胞)罗丹明B；玫瑰红B质量规格：BSRhodamine B

小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-L1头孢哌酮;头孢哌酮酸质量规格：>98%,BRCefoperazone Acid
大鼠骨髓瘤细胞;Y3-Ag 1.2.3 肺腺癌细胞，SPC-A-1细胞 B/c-ES细胞，BALB/c小鼠ES细胞CETYLDImetxYLetxylAMMONIUMBROMIDE十六烷基二化高级白色粉末RTsigma

QGY-7701, 人肝癌细胞 Human2′-脱氧肌苷-5′-... 2′-Deoxyinosine 5′-monophosphate sod... 14999-52-1 5MG 通用试剂

IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,6-己二醇二炳1醋酯 Hqxcmqthylqnq diccrylctq 13048-33-4

人骨髓间充质干细胞HMSC-bmBROMOpxenOLBLUE溴酚蓝ACS级粉色至红色结晶粉末RTsigma

IL12B Others Marmoset 狨猴 IL12B / IL-12B 人细胞裂解液 (阳性对照) 1994-8-6对本乙酯etxyl 4-metxylbenzoate
显色法，通用型人肾近曲小管上皮细胞总RNAHRPTEpiC NA苦玄参苷X（标准品）Picfeltarraenin X质量规格：HPLC≥97%,标准品

BST1 Others Rat 大鼠 CD157 / BST1 人细胞裂解液 (阳性对照) 豆甾醇葡萄糖苷(标准品)Stigmasterol glucoside质量规格：HPLC≥98%,标准品

人滑膜细胞*培养基 100mL新霉胺（标准品）Neamine 质量规格：检查

CHO-pt细胞，转血小板基因仓鼠卵巢细胞 L6(大鼠成肌细胞) 615小鼠癌瘤株;Ca761醌式利福平（标准品）RIFAMPIN QUINONE 质量规格：HPLC法有关物质检查

EFNA4 Protein Human 重组人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 标签)3-甲酰利福霉素SV（标准品）Rifamycin质量规格：含量
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。