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产品名称:

土壤脱氢酶(SDHA)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 197
更新时间: 2022-05-30
描述:土壤脱氢酶(SDHA)测试盒微量法公司正在出售的产品:叠氮钠葡萄糖肉汤 进口、国产Azide Dextrose Broth用于链球菌的增菌培养250乙基紫叠氮钠肉汤 进口、国产Ethyl Violet Azide Broth用于链球菌的增菌培养250KF链球菌琼脂 进口、国产KF Streptococcus Agar用于链球菌的选择性分离及计数(SN标准)100LIM进口、国产LIM Med

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6843

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

土壤脱氢酶(SDHA)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6843

商品介绍:

测定意义:

土壤脱氢酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤体系内活性微生物量以及其对有机物的降解活性,可以作为土壤微生物的降解性能指标。

测定原理:

氢受体2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在细胞呼吸过程中接受氢以后,被还原为三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈现红色,在波长485nm处有最大吸收峰,采用分光光度法于485nm测定其吸光值,即得土壤脱氢酶活性。

自备实验仪器及用品:

筛子、天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、漏斗,滤纸、可见分光光度计、玻璃比色可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、冰、蒸馏水、丙酮(不允许快递,请用户自备)。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

1mL C溶液,5mg/mL Mitomycin Solution  4℃避光保存

100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5  MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5  常温保存

5%乳糖发酵管  20支

2 ug pCAMBIA3300 pCAMBIA3300 低温运输,-20℃保存

双水解试验用(AD) Aaginine dehydrolase Medium 5g

5g  Inosine,Free Base   室温干燥保存

50T 淋球菌PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

25 mg DiBAC4(3) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

50mL Ammonium Acetate Solution(乙酸铵溶液),1M  Ammonium Acetate Solution,1M  常温保存

10mL miRNA尿素-PAGE上样液,6× miRNAoN -20℃保存

2 ug pYX212-VHB pYX212-VHB 低温运输,-20℃保存

土壤脱氢酶(SDHA)测试盒微量法Dog IgM/Cy7  Cy7标记的兔抗犬IgM抗体 规格: 0.1mlDCBLD2  内皮细胞和平滑肌细胞衍生的神经纤毛蛋白抗体 规格: 0.2ml

ANKRD45/CT117  瘤/睾抗原117 规格: 0.2mlVAPA  囊泡相关膜蛋白相关蛋白A抗体 规格: 0.2ml

Kappa-casein/CSN3  κ-酪蛋白抗体 规格: 0.2mlBeta-lactoglobulin  β-球蛋白抗体 规格: 1ml

Goat anti-Mouse IgG whole serum  羊抗小鼠IgG抗清 规格: 1mlMSR1/CD204  巨噬细胞清道夫受体1/2/3抗体 规格: 0.2ml

Phospho-PRKACB(Thr198)  磷酸化蛋白激C亚性抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG/Cy3  Cy3标记的兔抗鸡IgG 规格: 0.1ml

TNFRSF14/HVEM  瘤坏死因子受体超家族成员14抗体 规格: 0.2mlBTG3  高表达神经上皮蛋白BTG3抗体 规格: 0.2ml

KARS2/Lysyl tRNA synthetase  赖tRNA的连接抗体 规格: 0.2mlLCMT1  亮羧基甲基转移1抗体 规格: 0.2ml

EphA4  酪蛋白激A4抗体 规格: 0.1mlphospho-Cdc25B (Ser149)  磷酸化细胞分裂周期蛋白25B抗体 规格: 0.1ml

phospho-B-Raf (Ser602)  磷酸化B-Raf抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-mouse IgG-Fc/FITC  FITC标记的兔抗小鼠IgG-Fc 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗牛IgM 规格: 0.1mlRELN/Reelin  络丝蛋白抗体 规格: 0.1ml

phospho-STAT1 (Ser727)  磷酸化信号转导与转录激活因子1抗体 规格: 0.1mlFAM155A  FAM155A蛋白抗体 规格: 0.2ml

HOXB8  同源盒蛋白B8抗体 规格: 0.2mlLMO2  T淋巴细胞易位蛋白2抗体 规格: 0.2ml

 


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