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土壤酸性磷酸酶(SACP)测试盒荧光法

产品厂地: 上海市
访问次数: 183
更新时间: 2022-05-30
描述:土壤酸性磷酸酶(SACP)测试盒荧光法公司正在出售的产品:多价蛋白胨-酵母膏 (PY) 进口、国产Poly Peptone Yeast Extract Medium用于产气荚膜梭菌的培养(SN标准)250疱肉基础 进口、国产Cooked Meat Medium Base加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验(GB标准)250疱肉牛肉粒 进口、国产Dried Meat Pa

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6838

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:土壤酸性磷酸酶(SACP)测试盒荧光法

产品规格:100管/96样

检测方法:荧光法

产品货号:BK-01S6838

产品分类:土壤系列
商品介绍:

测定意义:

土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响。通常按照其最适pH范围,分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。

测定原理:

碱性环境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成和,通过测定酚的生成量即可计算出S-AKP/ALP活性。

自备仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、无水乙醇和甲苯。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

100次 胶回收及PCR片段纯化两用试剂盒 DNABACK & PCR Clean-Up Kit 常温保存

2 ug pGL3- enhancer pGL3- enhancer 低温运输,-20℃保存

琼脂B Agar medium B (Casein soya bean digest agar) 250g

1瓶 HEL细胞株 HEL 低温运输和保存

0.85%无菌生理盐水(9ml/支) 0.85% Sterile Saline 9ml*20支/包

10mg 亲和素 Avidin -20℃保存

125mL RNase-Free TE Buffer(无RNase的TE缓冲液),20X,pH7.4   RNase-Free TE Buffer,20X,pH7.4   常温保存

1 管 JM83大肠杆菌 JM83 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn pRNAi-Hys-H1 Lul/rxn 低温运输,-20℃保存

250mL 动物RNAout (TRIzol)  Animal RNAOUT(TRIzol) 4℃保存

2 ug pcDNA3.1-EGFP pcDNA3.1-EGFP 低温运输,-20℃保存

土壤酸性磷酸酶(SACP)测试盒荧光法phospho-RPA32/RPA2(Thr21)  磷酸化复制因子A蛋白2抗体 规格: 0.1ml

Phospho-p40phox (Thr154)  磷酸化嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体 规格: 0.1ml

APOA1  载脂蛋白A1抗体 规格: 0.1ml

ADCY1  苷酸环化1抗体 0.2ml

TLR7  Toll样受体7抗体 规格: 0.1ml

TNFRSF19  瘤坏死因子配体超家族成员19抗体 规格: 0.1ml

ChRM1/Acetylcholine receptor(M1)  毒蕈碱型乙酰受体M1抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的兔抗人IgG F(ab')2  规格: 0.1ml

MRCK alpha/CDC42BPA  CDC42结合蛋白激α抗体(MRCKα) 规格: 0.2ml

IL-5  白细胞介素5抗体 规格: 0.1ml

phospho-Caveolin-2(Tyr19)  磷酸化细胞质膜微囊蛋白-2抗体 规格: 0.1ml

MCC  大肠瘤突变蛋白抗体 规格: 0.2ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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