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土壤酸性磷酸酶(SACP)测试盒可见分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 74
更新时间: 2022-05-30
描述:土壤酸性磷酸酶(SACP)测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:葡萄糖酪胨琼脂进口、国产Dextrose Casein-peptone Agar用于食品中腊样芽胞杆菌鉴定和计数(APHA方法)250D-环丝 进口、国产加入250ml TSC琼脂基础中0.1g/支*2产芽孢肉汤 进口、国产Sporulation Broth用于产气荚膜梭菌的产芽孢培养250B 进口、国产Polymyxi

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6837

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

土壤酸性磷酸酶(SACP)测试盒可见分光光度法

50管/48样

可见分光光度法

BK-01S6837

商品介绍:

测定意义:

土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响。通常按照其最适pH范围,分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。

测定原理:

碱性环境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成和,通过测定酚的生成量即可计算出S-AKP/ALP活性。

自备仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、无水乙醇和甲苯。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

10ku 超氧化物歧化,人 Superoxide Dismutase -20℃保存

250mL Sodium Bicarbonate Buffer(钠缓冲液),0.5M,pH8.0   Sodium Bicarbonate Buffer,0.5M,pH8.0   常温保存

1 管 Rosetta-gami(DE3)大肠杆菌 Rosetta-gami(DE3) E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRSET C pRSET C 低温运输,-20℃保存

250mL 固相RNase清除剂 Surface RNase Erasol 常温

2 ug pcDNA6-Flag pcDNA6-Flag 低温运输,-20℃保存

麦芽汁 Malt Extract Medium 250g

5g 中性红 Neutral Red 室温保存

50T 芹菜PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

1 mg Fura-2 AM(钙离子荧光探针) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

250mL BSA Blocking Buffer in PBS  BSA Blocking Buffer in PBS  常温保存

土壤酸性磷酸酶(SACP)测试盒可见分光光度法GERP/TRIM8/RNF27  环指蛋白27抗体 规格: 0.2mlClassical swine fever virus, CSFV  猪瘟毒抗体 规格: 0.2ml

PID1  磷酸相互作用结构域蛋白1抗体 规格: 0.2mlAngiotensin III  管紧张素III抗体 规格: 0.2ml

CDK5RAP3  周期素依赖性激5激活结合蛋白C53抗体 规格: 0.2mlHSP47  热休克蛋白-47抗体 规格: 0.1ml

Defensin β1  防御素β1抗体 规格: 0.1mlDC-SIGNR/CD299  CD299抗体 规格: 0.2ml

C12ORF63  12号染色体开放阅读框63抗体 规格: 0.2mlPhospho-INPPL1(Tyr1135)  肌醇聚磷酸盐磷酸样蛋白1抗体 规格: 0.1ml

ZNF268  锌指脂蛋白抗体 规格: 0.1mlUBE2D1  泛素蛋白连接D1抗体 规格: 0.2ml

STAU2  双链RNA结合蛋白Staufen2抗体 规格: 0.2mlphospho-PP2A alpha/beta(Tyr119)  磷酸化蛋酸2A(PP2Aα)抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG  兔抗人IgG 规格: 1mgCYP1A1  细胞色素P450 1A1抗体 规格: 0.1ml

C6orf150  6号染色体开放阅读框150抗体 规格: 0.2mlCOMP/EPD1/THBS5  软骨寡聚基质蛋白抗体 规格: 0.1ml

PI 3 Kinase p85 beta  磷脂酰肌醇激p85β抗体 规格: 0.1mlGSTA3  S转移A3抗体 规格: 0.1ml

phospho-CPI17 alpha (Thr38)   磷酸化蛋酸激PKC/CPI-17抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-Biotin  兔抗抗体IgG 规格: 0.2ml

Dysferlin  Dysferlin蛋白抗体 规格: 0.1ml

 


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