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土壤硝酸还原酶(SNR)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 124
更新时间: 2022-05-30
描述:土壤硝酸还原酶(SNR)测试盒微量法公司正在出售的产品:改良Camp-BAP氏琼脂基础进口、国产Camp-BAP Agar Base,Modified用于弯曲杆菌选择性分离培养(GB标准)250TTC 琼脂基础 进口、国产TTC Agar Base用于弯曲杆菌的TTC试验(GB标准)250甘 进口、国产Glycine Medium用于弯曲杆菌甘耐受性试验(GB标准)2

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6832

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:土壤硝酸还原酶(SNR)测试盒微量法

产品规格:100管/48样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6832

产品分类:土壤系列
商品介绍:

测定意义:

S-NR催化土壤中硝酸盐还原为亚硝酸盐,是土壤硝态氮还原的关键酶。研究S-NR的活性对合理施肥,降低氮素的损失具有重要意义。

测定原理

S-NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ +NADH+H→ NO2ˉ +NAD+H 2 O;产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下,与对氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物;生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰,可用分光光度法测定。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

10g 脱氧胆酸钠 Deoxycholic Acid,Sodium Salt                室温干燥保存

50T 登革热病毒Ⅲ、Ⅳ型PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

50L Tricine-SDS-PAGE阴极电泳液(干粉) Tricine SDS-PAGE Anode Buffer 常温保存

2 ug pYES3CT pYES3CT 低温运输,-20℃保存

50次 DNA电泳分子量标准(λDNA/BstE II) DNAMETER(3) 4℃保存

1瓶 LA795(实体瘤)细胞株 LA795(实体瘤) 低温运输和保存

改良麦康凯肉汤(CT-MAC) Modified MacConkey Broth 250g

1mg 梭菌蛋白 Clostripain 4℃保存

250mL Stripping Buffer 3,4X Stripping Buffer 3,4X 常温保存

30次 一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒 One-Step Cytoplasmic Protein Miniprep Kit 4℃保存

2 ug pSIREN-RetroQ-DsRed-Express pSIREN-RetroQ-DsRed-Express 低温运输,-20℃保存

土壤硝酸还原酶(SNR)测试盒微量法ANKRD54  锚蛋白重复域54抗体 规格: 0.2ml

phospho-EGFR (Tyr1068)  磷酸化表皮生因子受体抗体 规格: 0.1ml

FSTL1/FRP  卵泡相关蛋白1 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgM/FITC  FITC标记的兔抗鸡IgM 规格: 0.3ml

PPP2R3A  蛋白质磷酸2调节亚基3A抗体 规格: 0.2ml

HPCL2  植烷酰辅A羟化2抗体 规格: 0.2ml

ICOS/CD278  诱导协同刺激分子CD278抗体 规格: 0.2ml

ITIH1  衍生透明质酸相关蛋白抗体 规格: 0.2ml

Hepatitis C Virus NS5a  丙型毒NS5A抗体 规格: 0.1ml

phospho-DES (Thr16)  磷酸化结蛋白抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/FITC  FITC标记的兔抗大鼠IgG 规格: 0.3ml

phospho-ROCK1(Thr455/Ser456)  磷酸化Rho相关蛋白激1抗体 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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