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土壤植酸酶测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 248
更新时间: 2022-05-30
描述:土壤植酸酶测试盒微量法公司正在出售的产品:羊胆盐进口、国产Bile salt from sheep25克BR牛胆盐进口、国产Bile salt from ox25克BR,60%猪胆盐进口、国产Bile salt from pig25克BR,65%禽胆盐进口、国产Bile salt from poultry25克BR

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6921

商品介绍:

测定意义:

植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。

测定原理

植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅,甲苯(不允许快递)。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

土壤植酸酶测试盒微量法

100管/48样

微量法

BK-01S6921

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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

B(4ug)  1ml/支*5

1瓶 NB-4细胞株 NB-4 低温运输和保存

双料乳糖胆盐发酵 Double Lactose Bile Medium 250g

100g β-  β-Amylase 4℃保存

1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X,low salt)  Tris Buffered Saline(TBS),10X,low salt)  常温保存

25mg 化的牛血清白蛋白 Biotin-BSA -20℃保存

2 ug pThio-His A pThio-His A 低温运输,-20℃保存

50支 B(尼龙头) Uterus Swabs 常温

2 ug pDsRed2-Express-N1 pDsRed2-Express-N1 低温运输,-20℃保存

D-环溶液  5ml*10

100g 柠檬酸钠,二水 Sodium Citrate Dihydrate 室温保存

土壤植酸酶测试盒微量法AIFM3  凋亡诱导因子3抗体 规格: 0.2ml

HCG/LH/FSH/TSH alpha  人绒毛膜促性激素α亚基抗体(Cg A) 规格: 0.1ml

CCL24  嗜酸粒细胞趋化蛋白24抗体 规格: 0.2ml

Goat Anti-rabbit IgG/FITC  FITC标记的羊抗兔IgG 规格: 0.3ml

CK2  细胞角蛋白2抗体 规格: 0.1ml

GLUT8  葡萄糖转运蛋白8抗体 规格: 0.2ml

Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143)  磷酸化斑联蛋白抗体 规格: 0.1ml

PFK2/PFKFB3  6磷酸果糖激2抗体 规格: 0.2ml

GABARAPL1  γ氨基丁酸受体相关蛋白样1抗体 规格: 0.2ml

Histone H2B  组蛋白H2B抗体 规格: 0.1ml

HSD11B1/HSD1  羟基类固醇脱11β1抗体 规格: 0.1ml

DRD2  多巴胺受体D2抗体 规格: 0.1ml

 


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