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甜菜碱含量测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 159
更新时间: 2022-05-30
描述:甜菜碱含量测试盒微量法公司正在出售的产品:精致蛋白胨进口、国产Peptone(From porcine meat)500克BR肉蛋白胨进口、国产Beef Peptone250克BR蚕蛹蛋白胨进口、国产蚕蛹蛋白胨250克BR血粉蛋白胨进口、国产血粉蛋白胨250克BR

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6933

商品介绍:

测定意义:

甜菜碱是一种广泛分布于动植物及微生物体内的季铵型水溶性生物碱,是生物体内的氧化产物,可以增强免疫力、降血脂、抗氧化、抗肿瘤,并可作为甲基供体,参与促进动物蛋白质和脂肪代谢、增进食欲、缓和应激、调节渗透压、稳定维生素等多种生物作用,在化工、医药、食品添加剂等领域有较广泛的应用。

测定原理

甜菜碱在强酸条件下和雷氏盐发生反应产生沉淀,沉淀用丙酮溶解形成红色溶液,在525nm处有特征吸收峰,测定525nm处的吸光值,可得样品的甜菜碱含量。

自备实验用品及仪器

天平、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、甲醇、、盐酸和蒸馏水。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

甜菜碱含量测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6933

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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

10mL 电泳级橙黄G溶液 Orange G Solution,EG 常温,避光干燥保存

2 ug pG-Tf2 pG-Tf2 低温运输,-20℃保存

临床检验系列  

1瓶 HT1080细胞株 HT1080 低温运输和保存

沙氏葡萄糖琼脂颗粒(2015药典)  250g

5mg 硫氧还蛋白 Thioredoxin -20℃保存

100mL Sodium Cacodylate Buffer(二甲胂酸钠缓冲液),0.1M,pH6.5   Sodium Cacodylate Buffer,0.1M,pH6.5   常温保存

1 管 Stbl4大肠杆菌 Stbl4 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pSE934 pSE934 低温运输,-20℃保存

5次 大提柱式植物RNAout Maxi Column Plant RNAOUT 4℃保存

2 ug pCFS119 pCFS119 低温运输,-20℃保存

甜菜碱含量测试盒微量法ATG16A/ATG16L1  自噬相关蛋白16A抗体 规格: 0.2ml

TP53I8/EI24  瘤蛋白p53诱导蛋白8 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/APC  APC标记的兔抗牛IgM 规格: 0.1ml

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr716)  磷酸化小板源性生因子受体B抗体 规格: 0.1ml

FbxO6  F-box蛋白相关蛋白6抗体 规格: 0.2ml

FoxP3  叉蛋白P3抗体 规格: 0.1ml

CD80/B7-1  刺激分子B7-1蛋白抗体 规格: 0.1ml

C17orf74  17号染色体开放阅读框74抗体 规格: 0.2ml

AKT/PKB  蛋白激B 规格: 0.1ml

FMDV Polyprotein (3D polymerase)  口蹄疫毒 0.2ml

Cyclin D3  周期素D3抗体 规格: 0.1ml

UGT1A9  尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移1A9 规格: 0.2ml



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