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吲哚乙酸氧化酶测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 132
更新时间: 2022-05-31
描述:吲哚乙酸氧化酶测试盒微量法公司正在出售的产品:沙保弱氏琼脂平板进口、国产沙保弱氏琼脂平板10块克氏铁琼脂斜面平板进口、国产KIA Plate10支弧菌选择琼脂平板进口、国产TCBS Agar Plate10块进口、国产Blood Agar Plate50块营养需求较高的细菌培养

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S7020

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:吲哚乙酸氧化酶测试盒微量法

产品规格:100管/96样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S7020

产品分类:植物激素系列
商品介绍:

测定意义:

吲哚乙酸(IAA)在吲哚乙酸氧化酶的作用下,被氧化破坏失去活性。植物体内吲哚乙酸氧化酶活力的大小,对调节体内吲哚乙酸的水平,起着重要的作用,而影响植物的生长。

测定原理:

在无机酸存在情况下,吲哚乙酸能与FeCl3作用,生成红色螯合物,该物质在530nm处有最大吸收峰,酶活力的大小可以其破坏吲哚乙酸的速度表示之。吲哚乙酸的含量可用比色法测定。

自备仪器和用品:

低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计、1.5mL离心管、1mL玻璃比色皿、和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

琼脂J Agar medium J (Deoxycholate citrate agar) 250g

1瓶 HCC94[HCC941122]细胞株 HCC94[HCC941122] 低温运输和保存

LST发酵管(含小倒管) LST 10ml*20支/包

500U Tma 核酸内切 III Tma Endonuclease III -20℃保存

志贺氏菌显色  1000ml

250mg 赤 Gibberellic Acid (GA3) 室温干燥保存

50T 花生PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

60µL 驴抗山羊IgG,碱性标记 Donkey Anti-Goat IgG,AP Conjugate  -20℃保存

2 ug pBiFC-bJunVN55(I152L) pBiFC-bJunVN55(I152L) 低温运输,-20℃保存

50mL DNA洗脱液  

2 ug pFAST II pFAST II 低温运输,-20℃保存

吲哚乙酸氧化酶测试盒微量法phospho-MAP4(Ser1046)  磷酸化微管相关蛋白4抗体 规格: 0.1ml

DcR1  瘤坏死因子配体超家族成员10C 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgM/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗小鼠IgM 规格: 0.1ml

CD166  活化白细胞粘附分子抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的兔抗人分泌型IgA 规格: 0.1ml

TRF2  端粒结合蛋白2抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Biotin/Cy7  Cy7标记的兔抗抗体IgG 规格: 0.1ml

PFKFB2  果糖-2,6-二磷酸心肌抗体 规格: 0.2ml

KLHL14  Kelch样蛋白14抗体 规格: 0.2ml

phospho-TOPO II Alpha (Ser1106)  磷酸化DNA拓普西异构Ⅱ抗体 规格: 0.1ml

ATG13  自噬相关蛋白13抗体 规格: 0.2ml

GIMAP6  GTPIMAP家族成员6抗体 规格: 0.2ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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