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  • 2021

    1-20

    鸡极低密度脂蛋白ELISA试剂盒双抗体夹心法:1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。...

  • 2021

    1-19

    转基因植物EPSPS基因核酸检测试剂盒反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:①引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。②引物扩增跨度:以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。③引物碱...

  • 2021

    1-14

    麻风杆菌(ML)核酸检测试剂盒实验要点:1.在适条件下,DNA—CTAB沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA.—CTAB沉淀。2.CTAB溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能*抑制RNA酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚的混合液,可减轻这...

  • 2021

    1-13

    TGF-β1elisa酶联免疫试剂盒操作步骤:1.取出试剂盒,室温(20-25℃)放置30分钟。2.分组:取出96孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6个浓度)、空白孔、待测样品组。注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。3.加样:依照标准品的顺序分别加入100ul的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入100ul的蒸馏水;其余微孔中加入100ul的待测样本。4.加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50...

  • 2021

    1-7

    马动脉炎病毒(EAV)核酸检测试剂盒反应的特异性决定因素:①引物与模板DNA特异正确的结合;②碱基配对原则;③TaqDNA聚合酶合成反应的忠实性;④靶基因的特异性与保守性。其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及TaqDNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就...

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