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丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒紫外分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 152
更新时间: 2022-05-20
描述:丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒紫外分光光度法辅酶Ⅰ系列公司正在出售的产品:大肠菌群显色培养基 英文名称:Coliform Chromogenic Medium 产品规格:1000(ML) 大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(第二代) 英文名称:E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 产品规格:1000(ML) 大肠杆菌/大肠菌群显色培养基(平皿) 英文名称: 产品规格:9CM

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6338

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒紫外分光光度法

产品规格:50管/48样

检测方法:紫外分光光度法

产品货号:BK-01S6338

产品分类:辅酶Ⅰ系列
商品介绍:

测定意义

测定意义:

PDC主要存在于酵母中,是乙醇发酵的关键酶之一,催化丙酮酸脱羧生成乙醛。

测定原理:

PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛,添加乙醇脱氢酶(ADH)来进一步催化 NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+NADH340 nm有吸收峰,而NAD+没有;通过测定340 nm光吸收下降速率,来计算PDC活性。

自备仪器和用品:

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

50次 脂蛋白纯化试剂盒  

2 ug pSRE-Luc pSRE-Luc 低温运输,-20℃保存

50次 柱式DNA清除剂 Column DNA Erasol 4℃保存

2 ug pCMV-SPORT6 TTC12 pCMV-SPORT6 TTC12 低温运输,-20℃保存

改良V-P培养基 V-P Medium,Modified 250g

100g 聚乙烯吡咯烷酮 K360 Polyvinylpyrrolidone(PVP K360) 室温保存

50T 乳腺癌耐药基因PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

200mg L-NAME(eNOS抑制剂) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL EDTA Solution(EDTA溶液),14%,pH7.4  EDTA Solution,14%,pH7.4  常温保存

0.5mL dNTP溶液,2.5 mM dNTP Solution,2.5 mM -20℃保存

2 ug pIRES-EGFP pIRES-EGFP 低温运输,-20℃保存

丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒紫外分光光度法DMRT3  睾特异性DMRT3蛋白抗体 规格: 0.2ml

VGLUT2  囊泡谷转运蛋白2抗体 规格: 0.2ml

Hpt/Haptoglobin  结合珠蛋白/触珠蛋白抗体 规格: 0.1ml

Phospho-ATP1A1(Tyr10)  磷酸化钠钾ATP蛋白a1抗体 规格: 0.1ml

mucin 5B/Muc5B  粘蛋白-5B抗体 规格: 0.2ml

TNFAIP3 interacting protein 3/ABIN3  瘤坏死因子α诱导相互作用蛋白3抗体 规格: 0.2ml

LASS2  瘤转移抑制基因1抗体 规格: 0.2mlGibberellins  抗赤霉素抗体 0.1ml

CENPP  着丝粒蛋白P抗体 规格: 0.2mlTIMP-1(NT)  金属蛋白组织抑制因子-1抗体(N端) 规格: 0.1ml

ACPT  睾酸性磷酸抗体 规格: 0.2mlCOPS7A  信号转导蛋白亚基7A抗体 规格: 0.2ml

FANCF  范可尼贫相关蛋白F抗体 规格: 0.2mlProteasome 20S alpha 3(Ser250)  磷酸化蛋白体PSMα3抗体 规格: 0.1ml

C9orf156  9号染色体开放阅读框156抗体 0.1mlNEU4  神经4抗体 规格: 0.2ml

CD2AP  白细胞分化抗原CD2AP抗体 规格: 0.1mlCDC40  细胞分裂周期同源蛋白40抗体 规格: 0.2ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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