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NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 182
更新时间: 2022-05-20
描述:幽门螺旋杆菌染色液公司其它产品IL17A Protein Canine 重组狗 IL17 / IL17A 蛋白*质量规格:>99%,USP,BR,可用于细胞培养Olanzapine
人神经细胞(HN) (10×106 ) 小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) MGC80-3(MGC-803)人胃癌细胞*(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6329

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6329

商品介绍:

测定意义

测定意义:

MDH EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDHTCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDHNADP-依赖的MDHNADP-MDH主要存在于真核细胞中。

测定原理:

NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

2 ug pEE12 pEE12 低温运输,-20℃保存

小肠结肠炎耶尔森氏菌成套生化鉴定管  10种*2套/盒*5盒

25g 牛胆酸钠 Taurocholic Acid Sodium Salt 室温干燥保存

50T 玉米T25 PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

500次 阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂 Alamar Blue Cell Proliferation And Cytotoxicity  -20℃避光保存

100mL HEPPSO Buffer,0.2M,pH8.5  HEPPSO Buffer,0.2M,pH8.5  常温保存

100次 免RNA提取RT-PCR试剂盒  Cell Lysate RT-PCR Mix -20℃保存

1000mL Citrate Buffered Saline or SSC,20X,pH7.0 Citrate Buffered Saline or SSC,20X,pH7.0 常温保存

有机磷细菌培养基 Bacterial organophosphorus Medium 250g

1瓶 NCI-H205细胞株 NCI-H205 低温运输和保存

去氧胆酸盐枸橼酸盐乳糖蔗糖琼脂 DCLS Agar 250g

NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒微量法Rabbit Anti-pig IgG/Bio  标记的兔抗猪IgG 规格: 0.1ml

Aurora A/B/C  有丝分裂激A/B/C抗体 规格: 0.2ml

phospho-SHC(Ser36)  磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体 规格: 0.1ml

phospho-MAPKAPK5(Thr182)  磷酸化p38调节/激活蛋白激抗体 规格: 0.1ml

NRSF/REST  神经元抑制蛋白抗体 规格: 0.1ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/AP  碱性磷酸(AP)标记的小鼠抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

NRIP  雄激素受体复合物相关蛋白抗体(核受体相互作用蛋白) 规格: 0.2ml

LAMR1(CT)  层粘连蛋白受体1抗体(C端) 规格: 0.2ml

FOXO1 + FOXO3 + FOXO4  叉蛋白O1/O3/O4抗体 规格: 0.2ml

Ret/HSCR1  原基因酪蛋白激受体RET/多发性内分泌瘤和甲状髓样蛋白抗体 规格: 0.1mlTAGL2/TAGLN2  细胞骨架相关蛋白2抗体 0.2ml

FADS1  脂肪酸去饱和1抗体 规格: 0.2mlphospho-MAPK14(Thr180)  磷酸化p38MAPK抗体 规格: 0.1ml

CD158i  NK细胞抑制性受体2DS4抗体 规格: 0.2mlARSK  芳香基硫酸酯K抗体 规格: 0.2ml

 


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