血管通透性测试染液

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞;293ET 人肾上皮细胞*培养基 100mL7,8-二氢生物蝶呤质量规格：HPLC>95%,BR7,8-Dihydro-L-biopterin

人支气管平滑肌细胞总RNAHBSMC NA整形素质量规格：>90%,BRChlorflurenol-methyl

小鼠雪旺细胞(MSC)(5×105)帕拉米韦三水合物质量规格：>98%,BRPeramivir Trihydrate

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36神经保护剂NXY059质量规格：>95%,BRNXY-059,Cerovive

小鼠胚胎成纤维细胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1) 小鼠小梁网细胞*培养基 100mLalpha-熊果苷质量规格：>98%,BRalpha-Arbutin
人脉络丝表皮细胞 (HCPEpiC)( 5×105 ) 人脐带血单个核细胞 Saos-2，人成骨肉瘤细胞TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制剂,大豆试剂级1G9035-81-8Frozen

CM-R025大鼠外周血白细胞*培养基100mL3-溴-5-羌基 (5-BROMO-PYRIDIN-3-YL)-MqTHcNOL 37669-64-0

DPEP2 Others Human 人 DPEP2 / MBD-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 来区坐 Lqtrozolq 11809-21-2

人绒毛间充质成纤维细胞HVMFFORMALDEHYDE,37%SOLUTION,37%溶液蛋白组学级500MLRT

JEG-3-VP16-TNFa细胞，TNFa转染耐VP16绒癌细胞 兔角膜前基质层成纤维细胞,RCFBF细胞 人微血管内皮细胞HMMEC2650-64-8N-苄氧羰基-L-谷酰胺N-Carbobenzyloxy-L-glutamine
BABL/C2 BABL/C小鼠胚胎细胞美罗培南Meropenem trihydrate质量规格：>98%,BR,三水合物

CL-0174NRK-52E(大鼠肾小管导管上皮细胞)5×106cells/瓶×2美罗培南(标准品)Meropenem trihydrate质量规格：HPLC>98%,标准品,三水合物

MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞硫酸卡那霉素Kanamycin mono sulfate质量规格：效价≥750IU/MG,BP,BR

人胚肾细胞-F克隆;293F 人肾成纤维细胞*培养基 100mL硫酸卡那霉素(标准品)Kanamycin mono sulfate质量规格：效价测定

人羊膜上皮细胞RNAHAmEpiC miRNA5 μg酮舍林1酸盐Ketanserin Tartrate质量规格：>98.5%,BR
血管通透性测试染液EB病毒转化的人B细胞;KM932L-(+)-2-Chloropxenylglycine(S)-2-录本甘酸25克BR，98%

THSD1 Others Mouse 小鼠 THSD1 / TMTSP 人细胞裂解液 (阳性对照) 酸脱羧酶 (R)-Oxynitrilase (40u/mg) 9024-43-5 500U 通用试剂

CL-0088H4-IIE(大鼠肝癌细胞 )5×106cells/瓶×2叶醋水合物 Folic ccid 29-30-3

VEGFA Others Human 人 VEGF / VEGFA / VEGF165 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2'-脱氧-2-扶胞苷，英文名或英文缩写：2-FDC，级别：特，98.5%，规格：25克

人脉络丛成纤维细胞裂解物HCPFL硅酮 OV-275NA
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。