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支原体ELISA检测试剂盒的工作原理及性能特点

更新时间:2024-06-03      点击次数:113
  支原体ELISA检测试剂盒是一种用于检测和诊断支原体感染的实验室工具。基于酶联免疫吸附测定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,ELISA)技术,该技术利用特异性抗体来检测和量化抗原的存在。
 

 

  支原体elisa检测试剂盒的组成:
  1.包被板:微孔板,其上已预涂有捕获抗体,这些抗体能够特异性识别并结合支原体抗原。
  2.标准品和对照:提供已知浓度的支原体抗原作为标准品,以及阴性和阳性对照,用于构建标准曲线和质量控制。
  3.检测抗体:特异性针对支原体抗原的酶标记抗体,用于检测和定量样品中的支原体抗原。
  4.底物溶液:在酶的催化下发生颜色变化的化合物,用于产生可视化信号。
  5.停止液:用于终止酶促反应,稳定颜色以进行测量。
  6.洗涤缓冲液:用于清洗微孔板,去除未结合的成分。
  7.说明书:详细介绍试剂盒的使用方法、注意事项和安全指南。
  工作原理:
  1.样品准备:首先收集适当的临床样本(如咽拭子、痰液或组织培养物),并进行必要的预处理。
  2.抗原捕获:将预处理的样品加入预涂有捕获抗体的微孔中,孵育以允许抗原与捕获抗体结合。
  3.洗涤:使用洗涤缓冲液去除未结合的物质,以确保只有特异性结合的抗原留在板上。
  4.检测抗体结合:加入酶标记的检测抗体,再次孵育以允许它们与捕获的抗原结合。
  5.再次洗涤:洗涤以去除未结合的检测抗体。
  6.底物反应:加入底物溶液,酶标记的检测抗体将催化底物转化为有色产物,其强度与样品中抗原的量成正比。
  7.停止反应:加入停止液,终止颜色发展,然后使用光谱光度计测量每个孔的吸光度。
  8.结果分析:通过比较样品的吸光度与标准曲线,计算样品中支原体抗原的浓度。
  特点与优势:
  1.高灵敏度:能够检测低至纳克级别的抗原,适用于早期感染的诊断。
  2.高特异性:通过使用特异性抗体,ELISA能够区分不同种类的支原体,减少交叉反应的可能性。
  3.宽动态范围:能够量化较宽范围内的抗原浓度,有助于评估感染的严重程度。
  4.可定量:通过构建标准曲线,ELISA可以提供样品中抗原的确切量,而不仅仅是阴阳性结果。
  5.适用于大规模筛查:试剂盒设计用于96孔板格式,适合自动化和高通量测试。
  6.低成本效益:与许多其他分子生物学技术相比,ELISA是一种成本效益高的方法,特别适合资源有限的环境。
  支原体elisa检测试剂盒的应用领域:
  1.临床诊断:用于诊断呼吸道、泌尿生殖系统等部位的支原体感染。
  2.流行病学研究:监测特定人群或动物种群中的支原体感染率和传播情况。
  3.疫苗开发:评估疫苗诱导的免疫应答和保护效果。
  4.研究和教育:作为研究工具,帮助科学家了解支原体的生物学特性和致病机制;在教学中作为实验材料,演示基本的免疫学原理和技术。

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