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NAD激酶(NADK)测试盒可见分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 109
更新时间: 2022-05-20
描述:NAD激酶(NADK)测试盒可见分光光度法辅酶Ⅰ系列公司正在出售的产品:GN增菌液颗粒 英文名称:Gram Negative Enrichment Broth 产品规格:250g 氯化钠蛋白胨缓冲液颗粒 英文名称:Buffered Sodium Chloride Peptone Solution 产品规格:250g MLCB寒天培地颗粒 英文名称:MLCB Agar 产品规格:250g 胰酪大豆胨

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6324

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:NAD激酶(NADK)测试盒可见分光光度法

产品规格:50管/24样

检测方法:可见分光光度法

产品货号:BK-01S6324

产品分类:辅酶Ⅰ系列
商品介绍:

测定意义

测定意义:

NADKEC 2.7.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是目前所发现的生物体内惟一能够催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)ATP或无机多聚磷酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及调节NAD(H)NADP(H)的平衡上具有重要作用。

测定原理:

NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPHNADPH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT),通过在600 nm下测定MTT的还原速度(吸光值的变化)可反映出NADK活性的大小。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

2 ug pGenesil- 2 pGenesil- 2 低温运输,-20℃保存

0.5%葡萄糖肉汤琼脂  250g

1瓶 Hepa1-6细胞株 Hepa1-6 低温运输和保存

225ml 3%氯化钠碱性蛋白胨水均质袋 3% NaCl Alkaline Peptone Water 10个/包

1.5mL RNase A溶液,10 mg/mL RNase A Solution 4℃(短期)或-20℃(长期)保存

50mL Potassium Chloride Solution(溶液),5M   Potassium Chloride Solution,5M   常温保存

1g 硫酸卡那干粉 Kanamycin Sulfate Powder 4℃避光保存

2 ug pProEX-c pProEX-c 低温运输,-20℃保存

糖发酵基础肉汤 Bromcresol Purple Broth Base 250g

5g 瑞氏色素 Wright Stain 室温保存

50T 转基因植物Sad1基因PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

NAD激酶(NADK)测试盒可见分光光度法Phospho-cdc2 (Tyr15)  磷酸化周期素依赖激2抗体 规格: 0.1mlCKLFSF7/CMTM7  趋化素样因子超家族成员7抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgG/Gold  胶体金标记的兔抗大鼠IgG 规格: 0.5mlATP7B  铜转运蛋白质β链抗体 规格: 0.1ml

VSIG4  T淋巴细胞负调节蛋白抗体 规格: 0.1mlTTF-2  甲状转录因子-2抗体 规格: 0.2ml

IL-31  白细胞介素31抗体 规格: 0.2mlHDBP2/PTTG1IP  瘤毒调控因子1抗体(锌指蛋白395) 规格: 0.2ml

CKLF  趋化素样蛋白抗体 规格: 0.2mlCyclin M2/CNNM2  周期素M2抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-Biotin/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗抗体IgG 规格: 0.1mlAdducin protein  内收蛋白抗体 0.1ml

FAM55D  FAM55D蛋白抗体 规格: 0.2mlRNF70  环指蛋白70抗体 规格: 0.2ml

NF66/alpha Internexin  α-中连蛋白抗体 规格: 0.2mlSTK3  丝/苏蛋白激3抗体 规格: 0.2ml

Phospho-Histone H3 (Thr3)  磷酸化组蛋白H3抗体 规格: 0.1mlGAPDH(3E12)-Loading Control  3-磷酸甘油醛脱单克隆抗体(内参抗体) 0.1ml

Dog IgM/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗犬IgM抗体 规格: 0.1ml

ZNF828/C13orf8  锌指蛋白828抗体 规格: 0.2ml

CHRNA4  碱型乙酰受体α4抗体 规格: 0.1ml 

 


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