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6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 140
更新时间: 2022-05-20
描述:6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒微量法辅酶Ⅱ系列公司正在出售的产品:含200ml生理盐水均质袋 英文名称:Physiological Saline 产品规格:200ml/袋*10 含225ml生理盐水均质袋 英文名称:Physiological Saline 产品规格:10个/包 含225mlEC肉汤均质袋 英文名称: 产品规格:10个/包 含225ml碱性蛋白胨水均质袋 英文名称:Alk

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6361

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6361

商品介绍:

测定意义:

磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。

测定原理:

6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPHNADPH430 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm吸光度增加速率,计算6PGDH活性。

自备仪器和用品:

低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

50T 丁型肝炎病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

25g OPD 干粉 OPD,Powder 避光保存

2 ug RNAi-Ready pSIREN-RetroQ RNAi-Ready pSIREN-RetroQ 低温运输,-20℃保存

1次 一步法96孔板单菌落质粒DNAout(真空法)  

2 ug pET-49b(+) pET-49b(+) 低温运输,-20℃保存

CN琼脂平板  9cm*10

1瓶 AAV-293细胞株 AAV-293 低温运输和保存

氯化钠蛋白胨缓冲液颗粒 Buffered Sodium Chloride Peptone Solution 250g

100µg 人基因组DNA,女性 Human Genomic DNA 4℃保存

500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.5   Phosphate Buffer,0.2M, pH7.5   常温保存

100uL 小麦Zein基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存

6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒微量法IL-33/NFHEV  白介素33抗体 规格: 0.1mlDonkey Anti-rabbit IgG/HRP  辣根过氧化物标记的驴抗兔IgG 规格: 0.1ml

Phospho-CHK2 (Thr68)  磷酸化细胞周期检测点激2抗体 规格: 0.1mlRabbit anti-horse IgG whole serum  兔抗马IgG抗清 规格: 1ml

Rabbit Anti-Biotin/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗抗体IgG 规格: 0.1mlPGGT1β  香叶烯基转移1β抗体 规格: 0.2ml

Aurora B/STK-1  有丝分裂激B抗体 规格: 0.1mlphospho-PPAR alpha(Ser12)  磷酸化α型-过氧化活化增生受体抗体 规格: 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的小鼠抗兔IgG 规格: 0.1mlGlycogen synthase 1  葡萄糖合成1抗体 规格: 0.2ml

SHP-1  造细胞磷酸抗体 规格: 0.1mlMTUS1/Angiotensin II Type 2 Receptor  管紧张素Ⅱ2型受体相互作用蛋白抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgM/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗马IgM 规格: 0.1mlIL-6  白介素6抗体 规格: 0.1ml

NGFR/p75NTR  神经生因子受体抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/Cy7  Cy7标记的兔抗马IgG 规格: 0.1ml

LAP3  亮氨基肽3抗体 规格: 0.2mlNDUFA9  NDUFA9蛋白抗体 规格: 0.2ml

Bone sialoprotein  骨涎蛋白抗体 规格: 0.1mlDGAT1/Diglyceride acyltransferase  二脂酰甘油酰基转移抗体 规格: 0.2ml

Na+/K+-ATPase Alpha1  Na+/K+-ATPase α1 钠钾ATPα1多肽抗体 规格: 0.2mlFBXW12/FBXO35  FBXW12蛋白抗体 规格: 0.2ml

SLY  2型猪链球菌溶素抗体 规格: 1mlC17orf78  17号染色体开放阅读框78抗体 规格: 0.2ml

 


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