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乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 166
更新时间: 2022-05-20
描述:乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒微量法辅酶Ⅰ系列公司正在出售的产品:结晶紫中性红胆盐琼脂平板(9cm) 英文名称:Violet Red Bile Agar 产品规格:10个/包 MFC琼脂平板(9cm) 英文名称:MFC Agar 产品规格:10个/包 Baird-Parker琼脂平板(9cm) 英文名称:Baird-Parker Agar Base 产品规格:10个/包 孟加拉红培养基平板(9cm)

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6347

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6347

商品介绍:

测定意义:

乙醛脱氢酶 (EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种,广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要作用是将乙醛氧化成乙酸,在酒精代谢中起主要作用。在人类和许多动物体内,线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化,所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注;同时,乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。

测定原理

在辅酶存在的条件下,乙醛脱氢酶催化乙醛和NAD+转化为乙酸和NADH,在340nm处的吸光值会增加,测定340nm处的吸光值变化,可计算得到乙醛脱氢酶的活性。  

自备实验用品及仪器

天平、离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

2 ug pcDNA3.1(+)/GFP Hsp70 pcDNA3.1(+)/GFP Hsp70 低温运输,-20℃保存

马铃薯葡萄糖琼脂(含) Potato Dextrose Agar(Chloramphenicol) 250

50g D-  D-Pantothenic Acid Hemicalcium Salt 4℃避光保存

气单胞菌培养基基础 Aeromonas Medium Base(Ryan) 250g

5mL 支气道上皮细胞生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

100mL Bicine Buffer,0.5M,pH9.0   Bicine Buffer,0.5M,pH9.0   常温保存

50次 DNA电泳分子量标准(φX174 DNA/Hinc Ⅱ) DNAMETER(3) 4℃保存

2 ug pGEX-4T-1-DsRed2 pGEX-4T-1-DsRed2 低温运输,-20℃保存

猪支原体培养基 Pig Mycoplasma Base 250g

1瓶 GLC-82 [GLC82]细胞株 GLC-82 [GLC82] 低温运输和保存

Bolton肉汤添加剂 Bolton Broth Supplement 1ml/支*5

乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒微量法Goat Anti-Chicken IgG/APC  APC标记的羊抗鸡IgG 规格: 0.1ml

CHPT1  甘油二酯磷酸转移抗体 规格: 0.2ml

FLAG Tag (CT)  FLAG Tag标签抗体(C端) 规格: 0.1ml

RBR2/Rb2 p130  视网膜母细胞瘤样蛋白2抗体 规格: 0.2ml

IGF I  胰岛素样生因子1抗体 0.1ml

MARCH9  膜相关环指蛋白9抗体 规格: 0.2ml

APOL6  载脂蛋白样蛋白6抗体 规格: 0.2ml

phospho-GATA1(ser142)  磷酸化珠蛋白转录因子1抗体 规格: 0.1ml

Layilin  透明质酸受体抗体 规格: 0.1ml

VRK1  牛痘毒相关激1抗体(丝/苏蛋白激VRK1) 规格: 0.2ml

SULT1A1  芳基磺基转移1抗体 规格: 0.2ml

Dynamin 2  动力蛋白2抗体 规格: 0.1ml

 


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