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甲醛脱氢酶(FDH)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 140
更新时间: 2022-05-20
描述:甲醛脱氢酶(FDH)测试盒微量法辅酶Ⅰ系列公司正在出售的产品:巧克力琼脂平板(9cm) 英文名称:Chocolate Agar 产品规格:10个/包 伊红美蓝琼脂平板(9cm) 英文名称:Eosin-Methylene Blue Agar 产品规格:10个/包 SS琼脂平板(9cm) 英文名称:Salmonella Shigella Agar 产品规格:10个/包 HE琼脂平板(9cm) 英文名称

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6345

商品介绍:

测定意义:

甲醛是一种能与蛋白质、核酸和脂类产生非特异性反应的活泼化合物,对所有生物都具有很高毒性。甲醛脱氢酶作为含锌中等链醇脱氢酶(ADH)的家庭成员之一,广泛存在于原核和真核生物中,该酶能利用NAD+作为辅酶,将有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途径中的关键酶。

测定原理

甲醛脱氢酶催化甲醛和NAD+产生NADH,在340nm处的吸光值会增加,测定340nm处的吸光值变化,可计算得到甲醛脱氢酶的活性。

自备实验用品及仪器

天平、离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

甲醛脱氢酶(FDH)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6345

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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

3%氯化钠碱性蛋白胨水 3%Sodium Chloride Peptone Water 9ml*20支/包

50mg D- 氨基酸氧化 D-Amino Acid Oxidase 4℃保存

250mL RNase-Free SSPE(无RNase的SSPE),20X,pH7.4   RNase-Free SSPE,20X,pH7.4   常温保存

1 管 JM1肠杆菌 JM110 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRNA-H1.1/Adeno pRNA-H1.1/Adeno 低温运输,-20℃保存

100mL 动物RNAout (TRIzol)  Animal RNAOUT(TRIzol) 4℃保存

2 ug pcDNA3.1/Zeo(+) pcDNA3.1/Zeo(+) 低温运输,-20℃保存

100次 动物种属鉴定PCR Mix 2(16S rDNA) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

5g 甲基橙 Methyl Orange 室温干燥保存

50T 牛海绵状脑病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

12x50nm Cyanine 3-NHS Ester Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

甲醛脱氢酶(FDH)测试盒微量法EBNA1/EBV Nuclear Antigen  EB毒核抗原1抗体 规格: 0.2ml

TPD54/TPD52L2  瘤蛋白D54蛋白抗体 规格: 0.2ml

PDGF AB+BB  小板源性生因子AB+BB抗体 规格: 0.2ml

TRIM17/RNF16  环指蛋白16抗体 规格: 0.2mlGlutaminase  谷抗体 0.2ml

PTEN/MMAC1(NT)  一种瘤抑制基因抗体(N端) 规格: 0.1mlTubulin-beta  微管蛋白抗体(免疫组化用抗体)Tubulinβ 规格: 0.1ml

M2-PK (pyruvate Kinase M2)  丙酮酸激-M2 规格: 0.1mlCDX2/3  尾侧型同源转录因子2/3抗体 规格: 0.2ml

KLHL22  Kelch样蛋白22抗体 规格: 0.2mlKLK2  激肽释放2抗体 规格: 0.1ml

phospho-TCF3/E2A/E47(Ser39)  磷酸化转录因子3抗体 0.1mlCXCL16  CXC趋化因子16抗体 规格: 0.1ml

Cecropin monoclonal  杀菌肽/天蚕抗菌肽单克隆抗体 规格: 1mlABH8/ALKBH8  AlkB同源蛋白8抗体 规格: 0.2ml

LIPK  脂肪家庭成员K抗体 规格: 0.2mlPerilipin A  脂滴包被蛋白Perilipin-A抗体 规格: 0.1ml

TLR11  Toll样受体11抗体 规格: 0.2mlPhospho-GRB10 (Tyr67)  磷酸化生因子受体结合蛋白10抗体 规格: 0.1ml

Sigma1R  衰老相关基因8蛋白抗体 规格: 0.2mlDonkey Anti-human IgG/Gold  胶体金标记的驴抗人IgG 规格: 0.5ml

 


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