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γ谷氨酰转肽酶(γGT)测试盒可见分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 196
更新时间: 2022-05-20
描述:γ谷氨酰转肽酶(γGT)测试盒可见分光光度公司正在出售的产品:Cary-Blair氏运送培养基管 英文名称:Cary-Blair Transport Medium 产品规格:20支/包 MEM维持液 英文名称:MEM maintenance of fluid 产品规格:36支/盒 无菌生理盐水管(内附采样棉签) 英文名称: 产品规格:10ml*20支/包 Hanks氏病毒保存液(pH

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6386

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:γ谷氨酰转肽酶(γGT)测试盒可见分光光度法

产品规格:50管/48样

检测方法:可见分光光度法

产品货号:BK-01S6386

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商品介绍:

测定意义:

γ-GTγ-谷氨酰循环中的关键酶,催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨酰基化合物上的γ-谷氨酰基转移到受体。也可以催化GSH和其他γ-谷氨酰基化合物的水解,产生谷盐,在细胞外新陈代谢中起了重要的作用。

测定原理:

γ-GT催化谷氨酰对硝基苯胺中γ-谷氨酰基转移给N-甘氨酰甘,生成对硝基苯胺,在405nm有特征光吸收;通过测定405nm光吸收增加速率,来计算γ-GT酶活性。

自备仪器和用品:

低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

50次 分枝杆菌RNAout  

2 ug pCMV5-300 pCMV5-300 低温运输,-20℃保存

检定培养基 Test Medium 250g

100mg Poly r(A) Poly r(A)  -20℃保存

500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.6   Phosphate Buffer,0.2M, pH7.6   常温保存

5nmol 接头DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I接头) Adaptors -20℃保存

2 ug pMW29 pMW29 低温运输,-20℃保存

knudson C 培养基 knudson C Medium 250g

1瓶 SW480细胞株 SW480 低温运输和保存

WS琼脂 WS Salmonella Agar 250g

25g 乙烯利 Ethrel   4℃保存

γ谷氨酰转肽酶(γGT)测试盒可见分光光度法AKT2  蛋白激B2 规格: 0.1ml

phospho-FRS2(Tyr436)  磷酸化成纤维细胞生因子受体底物2抗体 规格: 0.1ml

Syndecan 2/heparin sulphate protoglycans 1  硫酸肝素糖蛋白1抗体抗体 规格: 0.2ml

NFEM5/IRF4/MUM1  淋巴细胞特异性干扰素调节因子抗体 规格: 0.2mlEpigen  上皮细胞有丝分裂蛋白抗体 规格: 0.2ml

CKMT/Creatine kinase MT  酸性型线粒体肌酸激抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Goat IgG/AP  碱性磷酸(AP)标记的兔抗羊IgG 规格: 0.1ml

Rabbit anti-MG IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗爪沙鼠IgG 规格: 0.1mlCCDC90A  卷曲螺旋结构域蛋白90A抗体 规格: 0.2ml

KAT3B/Ep300  转录接蛋白EP300抗体 规格: 0.2mlCCDC124  卷曲螺旋结构域蛋白124抗体 规格: 0.2ml

Collagen V  Ⅴ型胶原抗体 规格: 0.1mlBCAS2  相关蛋白2抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgG/Gold  胶体金标记的兔抗羊IgG 规格: 0.5mlADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor  alpha 1上素能受体抗体 规格: 0.1ml

Phospho-HSP27 (Ser254)  磷酸化热休克蛋白27抗体 规格: 0.1mlNCE2  泛素结合E2F抗体 规格: 0.2ml

γ-Catenin  γ-连环素/连接蛋白γ抗体 规格: 0.2mlIGFR3/CD16  FC段γ受体3/免疫球蛋白G Fc段受体III抗体 规格: 0.1ml

Salmonella enteritidis/SE  肠沙门氏菌抗体 0.2mlTHRA1+2  甲状激素受体α1+α2抗体 规格: 0.2ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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