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脂质过氧化物(LPO)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 111
更新时间: 2022-05-24
描述:脂质过氧化物(LPO)测试盒微量法公司正在出售的产品:乳糖莫能葡萄糖醛酸琼脂 英文名称:LMG Agar 产品规格:250g Tergitol-7琼脂 英文名称:Tergitol-7 Agar 产品规格:250g A1培养基 英文名称:A1 Medium 产品规格:250g LesEndo琼脂 英文名称:m-Endo Agar,LES 产品规格:250g

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6411

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

脂质过氧化物(LPO)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6411

商品介绍:

测定意义:

脂质过氧化是动植物体内活性氧(ROS)氧化生物膜的过程,脂质过氧化物(LPO)是脂质过氧化过程的产物,即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成LPO,使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。因此,LPO常被作为机体氧化应激的一种指标,与某些疾病的病理过程,如肿瘤、化学中毒、感染、炎 症、自身免疫疾病、动脉粥样硬化(AS)及心脑血管疾病,以及衰老等生理过程密切相关。

测定原理:

LPO在酸性条件下加热,产生小分子终产物MDAMDA与硫代酸(thiobarbituric acidTBA)缩合,生成红色产物,在535nm有最大吸收峰。

需自备的仪器和用品:

分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

250mL Maleate Buffer(马来酸缓冲液),0.2M,pH7.0  Maleate Buffer,0.2M,pH7.0  常温保存

25OD 3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物 RNA Cap Structure Analogs -20℃保存

2 ug pMelBac B pMelBac B 低温运输,-20℃保存

0.1mL×10 Origami B(DE3) plysS感受态细胞  Origami B (DE3) plysS Competent Cell -80℃保存

25g 多聚甲醛 Paraformaldehyde 密封干燥保存

50T 人FGFR3 1138G/A多态性检测试剂盒(PCR-RLFP)  低温运输,-20℃保存

25 mg TMRE Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

500mL Carbonate Buffered Saline(盐缓冲盐水),5X,pH9.5  Carbonate Buffered Saline,5X,pH9.5  常温保存

10mL 电泳级溴蓝溶液 Bromophenol Blue Solution,EG 常温避光干燥保存

2 ug pHANNIBAL pHANNIBAL 低温运输,-20℃保存

沙氏葡萄糖肉汤培养基(EP) Sabouraud-dextrose Broth 250g

脂质过氧化物(LPO)测试盒微量法Cyclooxygenase 1/COX1  前列素氧化环化1抗体 规格: 0.1ml

MAP65/ASE 1  拟南芥MAP65蛋白抗体 0.2ml

Phospho-c-Fos(Thr232)  磷酸化c-fos抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗鸡IgG 规格: 0.1ml

C3orf24  3号染色体开放阅读框24抗体 规格: 0.2ml

BOLA1  BOLA1蛋白抗体 规格: 0.2ml

ARTS  凋亡相关蛋白TGFb信号抗体 规格: 0.2ml

phospho-A Raf(Ser214)  磷酸化A-Raf抗体 规格: 0.1ml

BRMS1  转移抑制基因1抗体 规格: 0.1ml

MuRF1/Trim63  肌肉细胞特异性泛素蛋白连接1抗体 规格: 0.1ml

SPINK1/SPINK3  瘤相关胰蛋白抑制剂1抗体 规格: 0.1ml

MARCH7/Axotrophin  膜相关环指蛋白7抗体 规格: 0.2ml

 


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