花青素还原酶（ANR）测试盒微量法

注意事项：

1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2，建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用（10μl试剂二原液+60μl蒸馏水）。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是（1）试剂二或试剂四没有现配现用；（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间30min可以延长到40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

特别提醒：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。

产品名称：花青素还原酶（ANR）测试盒微量法

产品规格：100管/96样

检测方法：微量法

产品货号：BK-01S6466

产品分类：氧化与抗氧化系列
商品介绍：

所需的仪器和用品：

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验

样本和试剂浪费！

1、样本制备

实验方法学：

一、肝素的配制：

市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集：

全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

亮绿乳糖胆盐培养液（BGB） Brilliant Green Lactose Bile Broth 250g

1瓶 MEF细胞株 MEF 低温运输和保存

MI培养基 MI Medium 1000ml

5g 腺硫酸盐 Adenine Sulfate 避光保存

100mL TEA Buffer,0.2M,pH7.0   TEA Buffer,0.2M,pH7.0   常温保存

10g 甜菜碱 Betaine 4℃保存

2 ug pGCsi/H1/Neo/GFP Survivin pGCsi/H1/Neo/GFP Survivin 低温运输，-20℃保存

抗生素检定培养基6号 Antibiotic Agar NO.6 250g

1瓶 Dami细胞株 Dami 低温运输和保存

含接触皿培养基平板（5.5cm） Contact Plate Medium 10个/包

1000U 大肠杆菌DNA连接（E.coli Ligase） E. coli DNA Ligase -20℃保存

花青素还原酶（ANR）测试盒微量法PMP2  周围神经髓鞘蛋白2抗体 规格: 0.2mlMAL/MPV17  T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体 规格: 0.2ml

phospho-PRKAA2(Ser173)  苷单磷酸活化蛋白激α2抗体 规格: 0.1mlMARCH1  膜相关环指蛋白1抗体 规格: 0.2ml

L-Citrulline  L-瓜抗体 规格: 0.2mgABHD13  水解结构域蛋白13抗体 规格: 0.2ml

FAST kinase  Fas活化的丝/苏激抗体 规格: 0.1mlUBE2A/UBE2B/RAD6  泛素结合E2蛋白A抗体 规格: 0.2ml

phospho-LSP1 (Ser252)  磷酸化白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体 规格: 0.1mlHIF3 alpha  缺氧诱导因子3α/HIF-3α抗体 规格: 0.1ml

CT DNA(calf thymus DNA)  小牛胸DNA抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗人IgG 规格: 0.1ml

FRMD5  FRMD5蛋白抗体 规格: 0.2ml

NOX2/gp91phox  NADPH氧化2抗体 规格: 0.1ml

FLAG Tag (NT)  FLAG Tag标签抗体（N端） 规格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的小鼠抗人IgM 规格: 0.1ml

phospho-RPS6KB1(Ser441+Thr444)  磷酸化核糖体S6蛋白激抗体 规格: 0.1ml