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多胺氧化酶(PAO)测试盒可见分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 97
更新时间: 2022-05-24
描述:多胺氧化酶(PAO)测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:氯化钠B肉汤基础(SCPB) 英文名称:Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 产品规格:250g B(2.5万单位) 英文名称:Polymyxin B 产品规格:2.5万单位/支*5 庆大琼脂 英文名称:Gentamycin Agar 产品规格:250g 我妻氏培养基基础 英文名称:Wagstsuma

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6473

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

多胺氧化酶(PAO)测试盒可见分光光度法

50管/48样

可见分光光度法

BK-01S6473

商品介绍:

测定意义:

多胺氧化酶是催化生物体内多胺氧化的关键酶,通过调节体内多胺水平和生成物的浓度,参与各种植物体对逆境胁迫的反应和生长发育过程。

测定原理:

PAO催化多胺氧化产生过氧化氢,在过氧化氢酶存在的条件下与底物显色,在550nm下有特征吸收峰,通过测定吸光值增加速率来反映PAO活性。

需自备的仪器和用品:

分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

2 ug pDsRed-Nuc pDsRed-Nuc 低温运输,-20℃保存

50次 真菌RNAout Fungal RNAOUT 4℃保存

25g  Silver Nitrate 室温干燥避光保存

50T 血清型耶尔森氏菌ail基因荧光PCR检测试剂盒(探针法)  低温运输,-20℃保存

200 mL 人胰岛细胞分离液1.056 Cell Separation Solution -20℃保存

100mL HEPES Buffer,0.5M,pH7.4  HEPES Buffer,0.5M,pH7.4  常温保存

1mL 绿如蓝染料,PCR级 DNAGREEN, PCR Grade -20℃保存

2 ug pLenti6/UbC/V5-DEST pLenti6/UbC/V5-DEST 低温运输,-20℃保存

固氮根瘤菌培养基 Nitrogen-fixing Rhizobium medium 250g

1瓶 MG-63细胞株 MG-63 低温运输和保存

琼脂培养基O Agar medium O(Baird-Parker agar) 250g

多胺氧化酶(PAO)测试盒可见分光光度法BIN3  细胞骨架衔接蛋白BIN3抗体 规格: 0.2mlFbxW2  FbxW2蛋白抗体 规格: 0.2ml

sLOX 1  可溶性凝集素样氧化脂蛋白受体1抗体 规格: 0.2mlTORC1/CRTC1  环苷酸应答元件结合蛋白转录共激活因子TORC1抗体 规格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM/Bio  标记的羊抗小鼠IgM 规格: 0.1ml

Plakophilin 2  桥粒斑菲素蛋白2抗体 规格: 0.2ml

MAP1A  微管相关蛋白1A抗体 规格: 0.1ml

C17orf77  17号染色体开放阅读框77抗体 规格: 0.2ml

DIAPH1  耳聋常染色体显性遗传相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Mouse Anti-Goat IgG/Cy7  Cy7标记的小鼠抗羊IgG 规格: 0.1ml

PADI4  关节相关基因抗体 规格: 0.2ml

ETBR/Endothelin B Receptor  内皮素B受体抗体 规格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgG/AP  碱性磷酸(AP)标记的羊抗小鼠IgG 规格: 0.1ml

PCDHA1  原钙粘附蛋白α1抗体 规格: 0.2ml

 


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