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查尔酮异构酶(CHI)测试盒可见分光光度法

简要描述:查尔酮异构酶(CHI)测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:营养V-B培养基(底层) 英文名称:minimum Nutritional V-B Medium 产品规格:250g 粘液酸盐测试肉汤 英文名称: 产品规格:1ml*20支 粘液酸盐质控肉汤 英文名称: 产品规格:1ml*20支 煌绿肉汤增菌液基础 英文名称:Brilliant Green Enrichment Broth Base 产

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-28
  • 访  问  量:398

详细介绍

商品介绍:

测定意义:

查尔酮异构酶(Chalcone isomerase, CHI)是个被认识的黄酮类化合物合成相关酶,也是黄酮代谢途径中的关键酶之一。查尔酮异构酶和查尔酮合酶一起构成了黄酮类化合物生物合成的限速酶。

测定原理:

查尔酮异构酶(CHI)催化查尔酮环化形成 4,5,7-三羟基黄烷酮,通过测定381nm下的吸光度变化表示CHI的活性。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

查尔酮异构酶(CHI)测试盒可见分光光度法

50管/48样

可见分光光度法

BK-01S6469

11.png 

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

10mL ONPG溶液,10mg/mL O-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside -20℃干燥避光保存

100mL Kinase Buffer IV,5X Kinase Buffer IV,5X 常温保存

5ug Oligo dT12-18引物 Oligo dT12-18 Primer -20℃保存

2 ug pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-non_shRNA_control (2041 ng) pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-non_shRNA_control (2041 ng) 低温运输,-20℃保存

FWA淡水鱼类琼脂培养基  250g

1瓶 NCTC 1469 [NCTC1469]细胞株 NCTC 1469 [NCTC1469] 低温运输和保存

阪崎肠杆菌分离琼脂(ESIATM) Enterobacter Sakazakii Isolation Agar 250g

5g N,N- 双 (2-  )-3- 氨基乙磺酸 BES 室温避光保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH8.8   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH8.8   常温保存

2×0.5mL 蛋白抑制剂混合液 Protease Inhibitor Cocktail -20℃保存

2 ug pTRV1 pTRV1 低温运输,-20℃保存

查尔酮异构酶(CHI)测试盒可见分光光度法ECM1  细胞外基质蛋白1抗体 规格: 0.1ml

GTPBP4/CRFG  GTP结合蛋白4抗体(慢性功能衰竭蛋白) 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗牛IgM 规格: 0.1ml

RNF148  环指蛋白148抗体 规格: 0.2ml

IFNAR1  干扰素α受体抗体 规格: 0.1ml

NESG1/CCDC19  鼻咽上皮细胞特异性蛋白1抗体 规格: 0.1ml

E1 glycoprotein  毒糖蛋白抗体 规格: 0.2ml

P-CK/Cytokeratin AE1 + AE3  广谱细胞角蛋白PCK抗体 规格: 0.1ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

FBXO31  F-box蛋白家族FBXO31抗体 规格: 0.2ml

CETP  酯转移蛋白抗体 规格: 0.2ml

CPB2/Carboxypeptidase B2  胰羧肽B2抗体 规格: 0.2ml

 


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