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植物铵态氮测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 101
更新时间: 2022-05-24
描述:植物铵态氮测试盒微量法公司正在出售的产品:YM11琼脂 英文名称:YM11 Agar 产品规格:250g OGY琼脂 英文名称:OGY Agar 产品规格:250g WL营养琼脂 英文名称:WL Nutrient Agar 产品规格:250g 改良沙氏琼脂培养基 英文名称:Sabouraud's Agar,Modified 产品规格:250g

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6498

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:植物铵态氮测试盒微量法

产品规格:100管/96样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6498

产品分类:氮代谢系列
商品介绍:

测定意义:

氮素是构成生物体的一种必需元素,自然界中的氮素循环包括许多转化作用。空气中的氮气被固氮微生物及植物与微生物的共生体固定成氨态氮,经过硝化微生物的作用转化成硝态氮,后者被植物或微生物同化成有机氮化物,植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。

测定原理

铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和作用,生成水溶性染料靛酚蓝,在625nm处有特征吸收峰,吸光值与铵态氮含量成正比。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

250mL Anticoagulant EDTA Solution(抗凝剂EDTA) Anticoagulant EDTA Solution 常温保存

50次 DNA电泳分子量标准(200-5000bp) DNAMETER 4℃保存

2 ug pGenesil-1.1 SLOOA pGenesil-1.1 SLOOA 低温运输,-20℃保存

培养基C(EP标准)  250g

1瓶 EL4细胞株 EL4 低温运输和保存

新生 Novobiocin 4.5mg/支*5

50U BAL 31核酸 BAL 31 Nuclease   -20℃保存

500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.2   Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH7.2   常温保存

2 ug pIZT/V5-His pIZT/V5-His 低温运输,-20℃保存

50T 肺炎支原体荧光定量PCR检测试剂盒(染料法)  低温运输,-20℃保存

50mL Western印迹膜抗体清除剂 Western Blot Antibody Erasol 室温保存

植物铵态氮测试盒微量法Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的兔抗人IgG 规格: 0.1ml

Caspr2  轴突相关CNTP2蛋白抗体(少突胶质细胞) 规格: 0.2ml

phospho-CK II beta(Ser209)  磷酸化丝/苏蛋白激II β(casein kinase IIβ)抗体 规格: 0.1ml

AGPAT1  溶磷脂酰基转移抗体 规格: 0.2ml

Phospho-HER2 (Tyr877)  磷酸化HER2受体抗体 规格: 0.1ml

Calcitonin  降钙素抗体 规格: 0.1ml

C-REL  淋巴细胞衍生C-型凝集素抗体 规格: 0.2ml

IAA  吲哚乙酸/植物生素单克隆抗体 规格: 0.2ml

PPP4C  丝/苏蛋酸4C抗体 规格: 0.2ml

SPC25  纺锤体极点构成蛋白25抗体 规格: 0.2ml

LCAT  卵磷酯酰基转移抗体 规格: 0.2ml

phospho-FAS (Tyr232)   磷酸化载脂蛋白A1抗体 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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