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酸性磷酸酶(ACP)测试盒可见分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 90
更新时间: 2022-05-24
描述:酸性磷酸酶(ACP)测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:胰酪胨大豆肉汤基础 英文名称:Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 产品规格:250g 改良V-P培养基 英文名称:V-P Medium,Modified 产品规格:250g 胰酪胨大豆羊血琼脂基础 英文名称:Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 产品规格:250g 酪

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6543

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

酸性磷酸酶(ACP)测试盒可见分光光度法

50管/24样

可见分光光度法

BK-01S6543

商品介绍:

测定意义:

ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。

测定原理:

在酸性环境中,ACP催化磷酸苯二钠水解生成,4-氨基安替和铁反应生成红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510nm吸光度增加速率,来计算ACP活性。

自备仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

酵母浸粉 Yeast Extract Powder 250g

1瓶 SMC细胞株 SMC 低温运输和保存

7.5%氯化钠肉汤培养基(2015药典)  250g

50g Fluorescein Sodium Salt 室温保存

50T 登革热病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

25g L- 谷钠 L-Glutamate Sodium    室温保存

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胰化大豆坚固绿琼脂  250g

100mg 核糖核酸 B Ribonuclease B 4℃保存

酸性磷酸酶(ACP)测试盒可见分光光度法Rabbit anti-chicken IgM whole serum  兔抗鸡IgM抗清 规格: 1mlDPOLA/DNA polymerase alpha  DNA聚合α抗体 规格: 0.2ml

ARA24  雄激素受体相关蛋白24抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-horse IgM/Cy3  Cy3标记的兔抗马IgM 规格: 0.1ml

CCDC138  卷曲螺旋结构域蛋白138抗体 规格: 0.2mlAQP8/Aquaporin 8  水通道蛋白8抗体 规格: 0.2ml

phospho-ITGB3(Tyr773)  磷酸化整合素β3抗体 规格: 0.1mlExportin 1/CRM1  染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1/染色体区域稳定必需蛋白抗体 0.1ml

THSD1  小板跨膜反应蛋白1抗体 规格: 0.2mlphospho-HNF4 (Ser304)  磷酸化肝细胞核因子4α抗体 规格: 0.1ml

IL-31RA/CRL3  白介素31受体a抗体 规格: 0.2mlGoat Anti-Chicken IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的羊抗鸡IgG 规格: 0.1ml

phospho-EGFR (Ser1166)  磷酸化表皮生因子受体抗体 规格: 0.1mlOPN/BSP  骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1) 规格: 0.1ml

Acetyl-Histone H4(K8)  乙酰化组蛋白H4抗体 规格: 0.1mlphospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198)  磷酸化苷单磷酸活化蛋白激α1抗体 规格: 0.1ml

CD161c/NK1.1  CD161抗体 规格: 0.2ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的羊抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml

CNKSR3  Ras激抑制因子连接增强蛋白3抗体 规格: 0.2ml

MMP-26  基质金属蛋白-26抗体 规格: 0.2ml

 


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