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赖氨酸(LYS)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 92
更新时间: 2022-05-24
描述:赖氨酸(LYS)测试盒微量法公司正在出售的产品:波尔顿选择性增菌肉汤添加剂 英文名称:Bolton Selective Enrichment broth additive 产品规格:2ml*5 改良CCD琼脂添加剂 英文名称:CCD Agar Additive 产品规格:1ml*5 脱纤维羊血 英文名称:Off fiber sheep blood 产品规格:50ml 改良Skirrow琼脂添加剂

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6538

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:赖氨酸(LYS)测试盒微量法

产品规格:100管/96样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6538

产品分类:氨基酸代谢系列
商品介绍:

测定意义:

赖是人体必需氨基酸之一,能促进人体发育、增强免疫功能,并有提高中枢神经组织功能的作用。赖为碱性必需氨基酸。由于谷物食品中的赖含量甚低,且在加工过程中易被破坏而缺乏,故称为限制性氨基酸。

测定原理:

蛋白质中的赖具有一个游离的ε-NH2,它与茚三酮试剂反应生成蓝紫色物质,其颜色的深浅在一定范围内与赖的含量成线性关系。亮与赖的碳原子数目相同,而且仅有个游离氨基(ε-NH2),所以通常用亮配制标准液。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水、水浴锅。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

2 ug pDsRed-Monomer-Golgi pDsRed-Monomer-Golgi 低温运输,-20℃保存

乳糖亚硫酸盐培养基(LS) Lactose Sulfite Medium(LS) 250g

2 ug pPICZα C pPICZα C 低温运输,-20℃保存

50T 志贺氏菌PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

200 mL 小鼠 NK 细胞分离液1.076 Cell Separation Solution -20℃保存

250mL HEPES Buffer,1M,pH8.5  HEPES Buffer,1M,pH8.5  常温保存

2mL dTTP溶液,2.5mM dTTP Solution -20℃保存

2 ug pLJM1-EGFP pLJM1-EGFP 低温运输,-20℃保存

Letheen肉汤 Letheen Broth 250g

1瓶 MRC-5细胞株 MRC-5 低温运输和保存

EEM培养基 EEM medium 250g

赖氨酸(LYS)测试盒微量法Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗猴IgM 规格: 0.1ml

T Beta 10  胸素β10抗体 规格: 0.1ml

CO4A2  胶原蛋白4a2亚基抗体 规格: 0.2ml

Donkey Anti-human IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的驴抗人IgG 规格: 0.1ml

BCL2L10  BCL2样10促凋亡蛋白抗体 规格: 0.2ml

Prominin 2  造干细胞抗原CD133相关蛋白抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-human IgM/PE  PE标记的兔抗人IgM 规格: 0.1ml

TOPO II/TOPO II Alpha  DNA拓普西异构Ⅱ抗体 规格: 0.1ml

RIMKLA/FAM80A  核糖体蛋白S6修饰样蛋白A抗体 规格: 0.2ml

SULT1E1/Estrogen Sulfotranferase  雌激素硫酸转移抗体 规格: 0.1ml

COMMD9  铜代谢结构域蛋白9抗体 规格: 0.2ml

phospho-NFATc2(Ser326)  磷酸化核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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