产品分类
相关文章

您的位置:首页 > 产品中心 > 生化检测试剂盒 > 脂肪酸代谢系列 > 顺乌头酸酶(ACO)测试盒微量法

产品中心
产品名称:

顺乌头酸酶(ACO)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 170
更新时间: 2022-05-24
描述:顺乌头酸酶(ACO)测试盒微量法公司正在出售的产品:3%过氧化氢试剂 英文名称: 产品规格:2ml*20支 SIM动力培养基 英文名称:SIM power medium 产品规格:250g 柠檬酸铁铵(0.05g/支) 英文名称:ironcitrate 产品规格:1ml/支*5 LEB肉汤 英文名称:Listeria Enrichment Broth 产品规格:250g

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6595

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

顺乌头酸酶(ACO)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6595

商品介绍:

测定意义:

顺乌头酸酶(aconitase),三羧酸循环中的酶,催化柠檬酸转变为异柠檬酸。柠檬酸本身不易氧化,在顺乌头酸酶作用下,通过脱水与加水反应,使羟基由β碳原子转移到α碳原子上,生成易于脱氢氧化的异柠檬酸,为进一步的氧化脱羧反应作准备。

测定原理

ACO催化柠檬酸转化成异柠檬酸,异柠檬酸氧化脱羧将NAD+ 还原生成NADH,导致340nm处光吸收上升。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

厌氧菌琼脂 Anaerobic Agar 250g

25g 葡聚糖凝胶 G-75 中颗粒 Sephadex G-75 Medium 室温保存

50T 小反刍兽RT-PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

200 mL 大鼠肿瘤细胞分离液1.061 Cell Separation Solution -20℃保存

250mL Glycine Buffer(缓冲液),0.2M,pH3.0   Glycine Buffer,0.2M,pH3.0   常温保存

1.5mL 明胶溶液,2%,PCR级 Gelatin Solution,PCR Grade -20℃保存

2 ug pLEGFP-C1 pLEGFP-C1 低温运输,-20℃保存

胰蛋白胨水培养基 Trytone Water medium 250g

1瓶 MDCK superdome细胞株 MDCK superdome 低温运输和保存

乳糖蛋白胨培养液 Lactose Peptone Broth 250g

100g 乙酰水杨酸 Acetylsalicylic Acid 常温保存

顺乌头酸酶(ACO)测试盒微量法phospho-BAD(Ser75)  磷酸化相关死亡促进因子抗体 规格: 0.1ml

TSPAN16/TM4-B  四分子交联体16抗体(四旋蛋白) 规格: 0.2ml

NLGN4Y  神经元Y连锁蛋白抗体(儿童自闭症相关蛋白) 规格: 0.2ml

FRMD1  FRMD1蛋白抗体 规格: 0.2ml

Lxn/Latexin  羧肽抑制剂抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-pig IgG/FITC  FITC标记的兔抗猪IgG 规格: 0.3ml

BubR1  有丝分裂检验点蛋白BubR1抗体 规格: 0.2ml

C12ORF42  12号染色体开放阅读框42抗体 规格: 0.2ml

HSD11B2  羟基类固醇脱11β2抗体 规格: 0.1ml

PCNP  PEST含核蛋白抗体 规格: 0.2ml

Phospho-p56Dok2(Tyr351)  磷酸化D酪激衰减蛋白2抗体 规格: 0.1ml

Bacillus anthraci protein  炭疽杆菌菌体蛋白抗体 规格: 0.2ml

 


相关产品

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

邮箱:2843593679@qq.com

地址:上海松江区莘砖公路518号5号楼601室

版权所有 © 2022 上海帛科生物技术有限公司   备案号:沪ICP备2021006739号-1  管理登陆  技术支持:环保在线  sitemap.xml

在线客服 联系方式 二维码

服务热线

13564080845

扫一扫,关注我们