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果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)测试盒微量法

简要描述:果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)测试盒微量法公司正在出售的产品:胆盐硫乳琼脂培养基 英文名称: 产品规格:250g 碘液 英文名称: 产品规格:2ml*20支 0.1%煌绿 英文名称: 产品规格:1ml*20 氯化钠琼脂培养基 英文名称:Mannitol Salt Agar Medium 产品规格:250g

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-27
  • 访  问  量:368

详细介绍

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6619

商品介绍:

测定意义:

植物叶绿体中果糖1,6-二磷酸醛缩酶是光合作用中参与calvin循环的重要酶。催化果糖1,6-二磷酸和景天庚酮糖1,7-二磷酸的合成反应,在各种逆境胁迫下表现不同的响应。

测定原理

果糖1,6-二磷酸醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸生成3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮,在磷酸丙糖异构酶和α-磷酸甘油脱氢酶作用下催化NADH和磷酸二羟丙酮生成NADα-磷酸甘油,340nm处吸光值的变化可反映果糖1,6-二磷酸醛缩酶活性的高低。

自备实验用品及仪器

天平、震荡仪、低温离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

1瓶 Ana-1细胞株 Ana-1 低温运输和保存

10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤培养基颗粒 10% Trypticase Soy Broth 225ml/袋*10

50次 DOP-PCR试剂盒 DOP-PCR Kit -20℃保存

500mL MOPS-EDTA-Sodium Acetate Buffer (MESA),10X MOPS-EDTA-Sodium Acetate Buffer (MESA),10X 常温保存

20次 DNA粘转平试剂盒 DNA Polishing Kit -20℃保存

2 ug pMIG-PP2A-Abeta pMIG-PP2A-Abeta 低温运输,-20℃保存

牛胆盐 Bile Salt 100g

1瓶 SK-MES-1细胞株 SK-MES-1 低温运输和保存

脑心浸出液肉汤(BHI)GB标准 Brain Heart Influsion Broth 250g

50mL 二甲基亚砜 ( 细胞培养级 ) Dimethyl Sulfoxide(DMSO)  室温干燥避光保存

50T 登革热病毒Ⅰ、Ⅱ型分型PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)测试盒微量法TNFR2/TRAF2/CD120b  瘤坏死因子受体相关因子2抗体 规格: 0.1mlUTS2R/GPCR GPR14  G蛋白偶联受体14抗体 规格: 0.1ml

ATP6V1G2/V-ATPase G2  离子转运ATP合成6G抗体 规格: 0.2mlLigamentum Nuchae Elastin  项韧带弹性蛋白抗体 规格: 0.2ml

UBCH6/UBE2E1  泛素蛋白连接E1抗体 规格: 0.2mlsVEGFR2  可溶性管内皮生因子受体2抗体 规格: 0.1ml

Phospho-MKK3(Ser189)/MKK6(Ser207)  磷酸化丝裂原活化蛋白激MKK3/6抗体 规格: 0.1mlMARCH11  膜相关环指蛋白11抗体 规格: 0.2ml

phospho-GAB2(Ser623)  磷酸化接蛋白Gab2抗体 规格: 0.1mlPACRG  麻疯和帕金森氏共同调节蛋白抗体 规格: 0.2ml

NOX4/NADPH oxidase 4  NADPH氧化4抗体 0.1ml

Rabbit anti-Avidin whole serum  兔抗亲和素抗清 规格: 1ml

PGCP  浆谷羧肽抗体 规格: 0.2ml

XDH/Xanthine Oxidase  氧化抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-MK IgM/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗猴IgM 规格: 0.1ml

Socs 1  细胞因子信号传导抑制蛋白1抗体 规格: 0.1ml

RENT1/hUPF1  ATP依赖解旋RENT1抗体 规格: 0.2ml

 


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