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碱性蛋白酶测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 104
更新时间: 2022-05-24
描述:碱性蛋白酶测试盒微量法公司正在出售的产品:抗生素检定培养基2号(低pH) 英文名称:Antibiotic Agar NO.2 产品规格:250g 抗生素检定培养基3号 英文名称:Antibiotic Agar NO.3 产品规格:250g 抗生素检定培养基4号 英文名称:Antibiotic Agar NO.4 产品规格:250g 抗生素检定培养基7号 英文名称:Antibiotic Agar N

产品介绍

品牌其他品牌BK-01S6627BK-01S6627

商品介绍:

测定意义:

AKP是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类,属于丝。此外,该酶还能够水解酯键、酰胺键,具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一,广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。

测定原理:

在碱性条件下,AKP水解酪蛋白生成酪;在碱性条件下,酪还原磷钼酸生成钨蓝;钨蓝在680nm有特征吸收峰,测定680nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、0.5 mL EP管和蒸馏水。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

碱性蛋白酶测试盒微量法

100管/48样

微量法

BK-01S6627

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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

250 T 过氧化氢定量分析试剂盒(脂兼容性) Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

50mL Manganese Sulfate Solution(硫酸锰溶液),0.5M  Manganese Sulfate Solution,0.5M  常温保存

100uL 卡拉抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存

250ml Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB)   Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB)   常温保存

布氏菌选择性培养基 Brucella Selective Medium 250g

1瓶 PC12细胞株 PC12 低温运输和保存

乙基紫叠氮钠肉汤 Ethyl Violet Aziode Broth 250g

1g CHAPS CHAPS 室温保存

250mL Zinc-Formalin  Zinc-Formalin  常温保存

25mL 十二烷基磺酸钠清除剂 SDS Erasol -20℃保存

2 ug pBBR1-MCS3 pBBR1-MCS3 低温运输,-20℃保存

碱性蛋白酶测试盒微量法HSL/LIPE  荷尔蒙敏脂肪抗体 规格: 0.1mlPhospho-NR1D1(Ser55/59)  磷酸化细胞核受体Rev-Erbα抗体 规格: 0.1ml

BNIP2  Bcl2相互作用蛋白2抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy3  Cy3标记的兔抗人IgG F(ab')2  规格: 0.1ml

EGFL7  类表皮生因子域7抗体 规格: 0.1mlTransthyretin  转甲状素蛋白抗体 规格: 0.1ml

phospho-c-Raf(Ser259)  磷酸化原基因c-Raf抗体 规格: 0.1mlWSTF  转录因子WSTF抗体 规格: 0.2ml

IGSF11  大脑和睾特异性免疫球蛋白超家族成员11抗体 规格: 0.2mlPhospho-p90RSK (Thr573)  磷酸化丝/苏激p90RSK蛋白抗体 规格: 0.1ml

RASSF7  RAS家族关联结构域蛋白7抗体 规格: 0.2mlGCDGP15/SABP  囊性组织液体蛋白15抗体 规格: 0.1ml

Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151)  磷酸化CREB转录共激活因子TORC1抗体 规格: 0.1mlADAR1 (N-terminus)  双链RNA苷酸脱氨基抗体(N端) 0.2ml

MIC1/C18orf8  结肠相关蛋白MIC1抗体 规格: 0.2mlDNAJB4/HSP40 homolog  热休克蛋白家族40抗体 规格: 0.1ml

PRL1/PTP4A1  肝再生磷酸酯1抗体 规格: 0.1mlMouse Anti-rat IgG/HRP  辣根过氧化物标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml

CD158b2  NK细胞抑制性受体2DL3抗体 规格: 0.2mlKLHL23  Kelch样蛋白23抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-human sIgA/FITC  FITC标记的兔抗人分泌型IgA 规格: 100ugCK1+5+10+14  高分子量角蛋白抗体 规格: 0.2ml

TRIM32  TRIM32抗体 规格: 0.1mlFBXO28  FBXO28蛋白抗体 规格: 0.2ml

 


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