胃蛋白酶Pepsin

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
HPrSMC Pellet 人类前列腺平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人星形胶质细胞cDNAHA cDNA芝麻素质量规格：HPLC≥98%，BRSesamin

CL-0106HFL1(人肺成纤维细胞)5×106cells/瓶×2芝麻素(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Sesamin

KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO细胞裂解液 (阳性对照) 槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Quercetin 3-O-glucoside-7-O-rhamnoside

人表皮色素细胞-浅色素裂解物HELM-l L知母皂苷A3(标准品)质量规格：HPLC(ELSD)>97%，标准品Timosaponin A3

新生牛眼晶体上皮细胞;NBLE 人甲状腺癌细胞，SW579细胞 RIN-m5F细胞，小鼠β瘤细胞正十五烷（标准品）质量规格：内标N-PENTADECANE
大鼠肾系膜细胞;RMC棕榈酸乙酯(standard for GC,≥99%(GC))质量规格：standard for GC,≥99%(GC)Ethyl palmitate

SMAD5 Others Mouse 小鼠 Smad5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 异辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)2-Ethylhexanoic acid

肺成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)吲达帕胺质量规格：>99%,EP6.0,BRIndapamide

人脑微血管内皮细胞 人肺癌细胞，NCI-H520[H520]细胞 SAC-IIB2(腹水瘤细胞)吲达帕胺（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Indapamide

人导管癌细胞;ZR-75-1帕醇(标准品)质量规格：HPLC>98%,USPIopamidol
人前脂肪细胞-皮下HPA-swo7iumMETABISULFITE焦亚钠(重亚钠)ACS级白色粉末RTsigma

ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 二苯基 Diphenylcarbinol,99% 91-01-0 25G 通用试剂

长尾绿猴胚胎细胞;4179碳醋胍;碳醋亚安脲;胍碳醋盐 Gucnidinq ccronctq 293-82-1

HL-7702细胞，肝细胞 人结肠腺癌细胞,LS180细胞 CM-R037大鼠小肠隐窝上皮细胞*培养基100mLPROTEINMWMARKER,HIGHRANGE蛋白Marker生物技术级液体FROZENsigma

大鼠肺泡巨噬细胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]577-11-7多库酯钠Docusate wo7ium
胃蛋白酶Pepsin人心肌细胞-心房总RNAHCF-aa NA洛索洛芬钠(标准品)Loxoprofen 质量规格：含量测定

CD38 Others Cynomolgus 食蟹猴 SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 丹皮酚Paeonol质量规格：>98.5%,BR

人大隐静脉内皮细胞*培养基 100mL丹皮酚(标准品)Paeonol质量规格：HPLC>98%,标准品

Ana-1细胞，小鼠巨噬细胞 WEHI 22.1(B细胞) 小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH2罗通定/左旋延胡索乙素/左旋四氢巴马汀Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine质量规格：≥97%,BR

CSF3R Protein Human 重组人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 标签)利拉萘酯Liranaftate质量规格：>99%,AR
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。