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脂肪酶(LPS)测试盒微量法

简要描述:脂肪酶(LPS)测试盒微量法公司正在出售的产品:培养基B(EP标准) 英文名称: 产品规格:250g 培养基1(USP) 英文名称: 产品规格:250g 培养基2(USP) 英文名称:Medium 2 产品规格:250g 抗生素检定培养基 8 号 英文名称: 产品规格:250g

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-26
  • 访  问  量:1198

详细介绍

商品介绍:

测定意义:

LPS又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS广泛的存在于各种生物中。对于人来说,主要是胰脂肪酶,分解食物中脂肪形成单酰甘油和游离脂肪酸,被人体吸收并重新合成脂肪。外源性脂质摄入过多是引发肥胖的重要原因,血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

测定原理

LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。

实验中所需仪器和用品

甲苯、无水乙醇、研钵、冰、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪和双蒸水。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

脂肪酶(LPS)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6639

11.png 

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

40uL×4 双脱氧dNTP溶液(10mM) ddNTP Solution -20℃保存

2 ug pLLP-STII pLLP-STII 低温运输,-20℃保存

羽绒羽毛微生物检验  

1瓶 MV3细胞株 MV3 低温运输和保存

Voges-Proskauer(V-P)试剂 V-P Box 5ml*4

1g 洋红 Carmine 室温干燥避光保存

1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X  Tris Buffered Saline(TBS),10X  常温保存

10mL Sephacryl S-400基质 Sephacryl S-400 4℃保存

2 ug pTetOne pTetOne 低温运输,-20℃保存

50支   Oral Swab 常温

2 ug pDsRed2.1 pDsRed2.1 低温运输,-20℃保存

脂肪酶(LPS)测试盒微量法p55/DCAF1  染色质组装因子1P55抗体 规格: 0.2ml

NDUFA8  NADH脱α家族8抗体 规格: 0.2ml

HA tag(12CA5)  HA tag标签单克隆抗体 规格: 0.1ml

UBE2V1/UEV1A  泛素结合E2变异体1抗体 规格: 0.2mlGRM3  促代谢型谷受体M3抗体 规格: 0.2ml

Robo4  瘤管内皮调节蛋白Robo4抗体 规格: 0.2mlClostridium perfringens type D  D型产气荚膜梭菌抗体 规格: 1ml

MTLR  胃动素受体抗体 规格: 0.1mlphospho-NFKB p65(Ser529)  磷酸化细胞核因子抗体 规格: 0.1ml

Eph receptor A2+A3+A4  内皮细胞受体蛋白酪激A2+A3+A4抗体 规格: 0.2mlphosphor-SMAD2(Ser425)  磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体 规格: 0.1ml

TIGAR  TIGAR蛋白抗体 规格: 0.1mlCD56/NCAM1  神经细胞粘附分子1抗体 规格: 0.1ml

APOE/Apo E2  载脂蛋白E抗体 规格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/Cy7  Cy7标记的羊抗兔IgG 规格: 0.1ml

HEATR3  HEATR3蛋白抗体 规格: 0.2mlIntegrin Alpha X/CD11c  整合素αX抗体 规格: 0.1ml

Calpastatin  钙蛋白抑制蛋白抗体 规格: 0.1mlPhospho-FRA1(Ser265)  磷酸化FRA-1蛋白抗体 规格: 0.1ml

Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167)  磷酸化雌激素受体ER alpha 抗体 规格: 0.1mlCD167b/DDR2  盘状结构域受体蛋白2抗体 规格: 0.2ml

 


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