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产品名称:

肝脂酶(HL)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 146
更新时间: 2022-05-24
描述:肝脂酶(HL)测试盒微量法公司正在出售的产品:假单胞菌琼脂培养基F 英文名称:Pseudomonas Agar for Detection of Fluorescin 产品规格:250g 假单胞菌琼脂培养基P 英文名称:Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin 产品规格:250g 液体乳糖培养基 英文名称:Fluid Lactose Me

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6645

商品介绍:

测定意义:

肝酯酶是脂肪分解酶,在肝实质细胞中合成,存在于肝脏窦周间隙内皮细胞表面和窦周间隙腔面的肝细胞微绒毛表面,可促进脂蛋白中的向类固醇激素转化,血浆中的HL活性增高时,血浆中小颗粒可导致LDL水平升高,加速动脉粥样硬化的发生。

测定原理

肝酯酶水解α-乙酸萘酯产生α-萘酚,可与固蓝B盐形成紫红色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与肝酯酶活性成正相关。

自备实验用品及仪器

天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计、微量石英比色皿。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

肝脂酶(HL)测试盒微量法

100管/48样

微量法

BK-01S6645

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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

1%亚碲酸钾溶液  5ml*10

1瓶 LII细胞株 LII 低温运输和保存

PBS-Tween20洗液 PBS-Tween20 lotion 250g

100mg 胶原Ⅲ型 Collagenase Type Ⅲ 4℃保存

250mL Succinate Buffer(琥珀酸缓冲液),0.2M,pH4.5  Succinate Buffer,0.2M,pH4.5  常温保存

50次 液体样品蛋白纯化回收试剂盒 Liquid Sample Protein Purification Kit 常温保存

2 ug psiRNA-hH1-neo psiRNA-hH1-neo 低温运输,-20℃保存

50gsu 人重组TFIIB rhTFIIB 4℃保存

2 ug pDNR1 pDNR1 低温运输,-20℃保存

改良CCD琼脂添加剂 CCD Agar Additive 1ml*5

25g 猪胆盐 Pig Bile Salts 室温保存

肝脂酶(HL)测试盒微量法AU5 tag  AU5 tag标签抗体 规格: 0.1ml

PAR4  蛋白活化受体4抗体 规格: 0.1ml

TBRG4  转化生因子β调节蛋白4抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗羊IgM 规格: 0.1ml

FBXL15  FBXL15蛋白抗体 规格: 0.2ml

EphB1/Eph receptor B1  酪蛋白激受体B1抗体 规格: 0.2ml

phospho-FOXO4 (Ser197)  磷酸化叉蛋白4抗体 规格: 0.1ml

SESN3  Sestrin3抗体 规格: 0.2ml

ZNF474/ZFP106  锌指蛋白474抗体 规格: 0.1ml

TSPAN3  四分子交联体3抗体(四旋蛋白) 规格: 0.2ml

C17orf57  17号染色体开放阅读框57抗体 规格: 0.2ml

CCDC92  卷曲螺旋结构域蛋白92抗体 规格: 0.2ml

 


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