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可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 87
更新时间: 2022-05-24
描述:可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒微量法公司正在出售的产品:远藤氏琼脂 英文名称:Endo Agar 产品规格:250g 乳糖蛋白胨半固体培养基 英文名称:Lactose Peptone Semisolid Medium 产品规格:250g 胰蛋白胨水培养基 英文名称:Trytone Water medium 产品规格:250g 动力-硝酸盐培养基(B法) 英文名称:Power - nitrate

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6685

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6685

商品介绍:

测定意义:

SSSEC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。

测定原理

SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPHNADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比,340nm下测定NADPH增加量即可计算SSS活性。

需自备的的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

25mL Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (reducing,4X)   Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (reducing,4X)   常温保存

30次 石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒 FFPE WGA Kit -20℃保存

2 ug pAD-TRAF pAD-TRAF 低温运输,-20℃保存

可溶性淀粉琼脂 Soluble Starch Agar 250g

1瓶 OP9细胞株 OP9 低温运输和保存

MI琼脂培养基平板  9cm*10个

5g 溴蓝 Bromophenol Blue 室温干燥保存

125mL Triton Lysis Buffer,2X  Triton Lysis Buffer,2X  常温保存

5mL 抑氨肽,5mg/mL Bestatin Solution -20℃保存

2 ug pUB6/V5 His A pUB6/V5 His A 低温运输,-20℃保存

10次 Southern级细菌(G-)DNAout  

可溶性淀粉合成酶(SSS)测试盒微量法Glycophorin C/CD236  糖蛋白C抗体 规格: 0.1mlTNFC/lymphotoxin Beta  瘤坏死因子C/淋巴毒素β抗体 规格: 0.2ml

ECRG4/C2orf40  食道相关基因4蛋白抗体 规格: 0.2mlSPRR1a/Cornifin A  角质蛋白α抗体 规格: 0.2ml

phospho-RGS19(Ser24)  磷酸化G蛋白信号转导调节因子19抗体 规格: 0.1mlLIR-8/CD85c/LILRB5  白细胞免疫球蛋白样受体8抗体 规格: 0.2ml

XRCC4  X射线修复交叉互补蛋白4抗体 规格: 0.2mlMAGEA12  黑色素瘤相关抗原12抗体 规格: 0.2ml

PCNA-Proliferation Marker  增细胞核抗原抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/Bio  标记的兔抗马IgG 规格: 0.1ml

ING1/p33  生抑制因子基因1抗体 规格: 0.1mlGFAP delta  胶质纤维酸性蛋白GFAPδ抗体 规格: 0.2ml

GRK5  G蛋白偶联受体激5抗体 规格: 0.2mlCXCL7/NAP-2/PPBP  小板趋化因子7蛋白抗体 规格: 0.1ml

BRCAA1/RBBP1L1  相关抗原BRCAA1抗体 规格: 0.2mlCGP-39/YKL-40  软骨糖蛋白39抗体 规格: 0.1ml

CAMTA1  钙调蛋白结合转录激活因子1抗体 规格: 0.2mlPhospho-Paxillin(Tyr31)  磷酸化桩蛋白Paxillin抗体 规格: 0.1ml

NHLRC3  非霍奇金重复蛋白3抗体 规格: 0.2mlIL-1 Beta/IL-1B  白介素1β抗体 IL-1β 规格: 0.1ml

SARS S-protein  抗表面S蛋白抗体 规格: 0.1mlMCM2  微小染色体维持缺陷蛋白2抗体 规格: 0.1ml

MGMT  O6甲基DNA甲基转移抗体 规格: 0.2mlLH  人促黄体生成素抗体 规格: 0.1ml

 


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