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淀粉磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 88
更新时间: 2022-05-24
描述:淀粉磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法公司正在出售的产品:固氮菌用阿须贝氏培养基 英文名称:Nitrogen-fixing bacteria with the A Sugai’s medium 产品规格:250g 无机磷细菌培养基 英文名称:Inorganic phosphorus bacteria 产品规格:250g 有机磷细菌培养基 英文名称:Bacterial organophosphor

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6694

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:淀粉磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法

产品规格:50管/48样

检测方法:紫外分光光度法

产品货号:BK-01S6694

产品分类:淀粉系列
商品介绍:

测定意义:

淀粉磷酸化酶(Starch PhosphorylaseSP)是淀粉代谢过程的可逆反应酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。

在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于质体中,负责延长淀粉的 α-1,4-葡萄糖链的非还原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于细胞质基质中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷键磷酸解产生葡萄糖-1-磷酸,负责葡萄糖链的磷酸解,是淀粉代谢过程中的关键酶。

在植物体中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物无机磷浓度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸浓度几乎高了两个数量级,一般认为淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要测定意义。

测定原理:

淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷键与无机磷反应产生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖变位酶的作用下产生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下还原NADP+产生NADPH,使340nm下吸光值增加。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

假单胞CFC选择性培养基添加剂(冻干)  1ml*5

1瓶 Ls-174-T细胞株 Ls-174-T 低温运输和保存

TGE琼脂 TGE Medium 250g

1g 可溶性 B Amphotericin B Solubilized -20℃保存

100mL TABS Buffer,0.2M,pH9.5   TABS Buffer,0.2M,pH9.5   常温保存

50次 糖蛋白蛋白纯化试剂盒  

2 ug pspT18 pspT18 低温运输,-20℃保存

15次 非DNA清除剂-2 DNA Erasol-2 4℃保存

100mL PBS-EDTA Solution,5X PBS-EDTA Solution,5X 常温保存

胰酪胨大肉汤基础 Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 250g

100g 聚乙烯吡咯烷酮 K-30 Polyvinylpyrrolidone(PVP K-30) 室温密闭干燥保存

淀粉磷酸化酶(SP)测试盒紫外分光光度法MIDN  中脑核仁蛋白抗体 规格: 0.2ml

Glucagon  抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgG  兔抗豚鼠IgG 规格: 1mg

NeuN  神经元核抗原抗体 规格: 0.1ml

XKR1  膜转运蛋白XK抗体 规格: 0.2ml

GLB1L3  β半糖苷1样蛋白3抗体 规格: 0.2ml

P63 protein/P51A  P63 瘤抑制基因抗体 规格: 0.1ml

phospho-IKK beta(S474)  磷酸化KB抑制蛋白激β抗体 规格: 0.1ml

FASTKD2  Fas活化激结构域蛋白2抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗豚鼠IgM 规格: 0.1ml

NLGN4X  神经元X连锁蛋白抗体(儿童自闭症相关蛋白) 规格: 0.2ml

MBD1/PCM1  甲基化CpG结合蛋白抗体 规格: 0.1ml 

 


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