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蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 118
更新时间: 2022-05-24
描述:蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)测试盒微量法公司正在出售的产品:淀粉水解培养基 英文名称:The Hydrolysis of Starch Medium 产品规格:250g 硅酸盐细菌培养基 英文名称:Silicate Bacteria Medium 产品规格:250g GVC增菌液 英文名称:GVC Enrichment Broth 产品规格:250g BSSA培养基 英文名称:BSSA Medi

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6703

商品介绍:

测定意义:

蔗糖是源(叶片等)光合产物向"器官运输的主要形态。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是双向反应酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代谢的关键酶之一。研究其分解方向SS-Ⅰ的活性对于植物蔗糖降解以及淀粉合成具有重要意义。

测定原理

SS-Ⅰ催化蔗糖和UDP生成游离果糖和UDPG,采用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖的含量来反映酶活性的高低。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)测试盒微量法

100管/48样

微量法

BK-01S6703

11.png 

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

1瓶 C1.Ly1+2-/9细胞株 C1.Ly1+2-/9 低温运输和保存

50mL RIPA Buffer,5X  RIPA Buffer,5X  常温保存

1 管 DB3.1大肠杆菌 DB3.1 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRetroX-IRES-ZsGreen1 pRetroX-IRES-ZsGreen1 低温运输,-20℃保存

副溶血性弧菌成套生化鉴定管(SN/T0173-2010)  16种*1套/盒*5盒

2 ug pcDNA3.1(+)/GFP pcDNA3.1(+)/GFP 低温运输,-20℃保存

营养盐琼脂 Nutrient agar 250g

100g 马来酸 Maleic Acid 室温密封保存

50T 诺沃克病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

1g 氯吡苯脲 Forchior Fennron    室温保存

100mL Bicine Buffer,0.5M,pH8.5   Bicine Buffer,0.5M,pH8.5   常温保存

蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)测试盒微量法AKAP2  蛋白激A2抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗大鼠IgM 规格: 0.1ml

CD329/SIGLEC8  CD329抗体 规格: 0.2ml

KCNE1  钾离子通道蛋白家族成员1抗体 规格: 0.2ml

DYDC1  DYDC1蛋白抗体 规格: 0.2ml

Phospho-Lamin A/C(Ser22)  磷酸化核纤层蛋白A/C抗体 规格: 0.1ml

Phospho-Dab1 (Tyr220)  磷酸化Disabled 1抗体 规格: 0.1ml

ACTH (18-39)  促上皮质激素ACTH(18-39)抗体 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Cy5.5  Cy5.5标记的小鼠抗兔IgG 规格: 0.1ml

Phospho-CHEK1 (Ser296)  磷酸化细胞周期检测点激1抗体 规格: 0.1ml

CD336/NKp44/NCR2  细胞毒性受体NK-p44抗体 规格: 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的小鼠抗兔IgG 规格: 0.1ml

 


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