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本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
海藻糖合成酶(TS)测试盒微量法 | 100管/48样 | 微量法 | BK-01S6719 |
商品介绍:
测定意义: 海藻糖是功能性低聚糖,具有非还原性、保湿性、热酸稳定性、抗冻结性等特性,是细胞在不良环境条件下产生的一种重要的抗逆应激物之一,它对生物大分子和生物体组织有着非特异性的保护作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麦芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的关键途径之一。 测定原理: TS催化麦芽糖产生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麦芽糖为葡萄糖,通过葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量,按照麦芽糖减少的量表示海藻糖合酶活性。 需自备的仪器和用品: 分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂组成和配制:
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
48 T 唾液酸测试盒(带SA标准) Oxidative Stress Detection Kit 常温保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH9.0 MES Buffer,0.5M,pH9.0 常温保存
100次 鸟类种属鉴定PCR Mix(线粒体CO1基因) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pMAl-c2E pMAl-c2E 低温运输,-20℃保存
明胶蛋白胨 Gelatin Peptone 250g
250mL Carbonate Buffer(盐缓冲液),0.5M,pH10 Carbonate Buffer,0.5M,pH10 常温保存
肠球菌琼脂(胆汁七叶苷叠氮钠琼脂) Bile Aesculin Azide Agar 250g
25mg 8- 环戊基 -1,3- 二丙基 8-Cyclopentyl-1,3-Dipropylxanthine 室温保存
50T 蚕白僵菌PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
20L SDS-PAGE电泳液(干粉) SDS-PAGE Running Buffer 常温保存
2 ug pXT7 pXT7 低温运输,-20℃保存
海藻糖合成酶(TS)测试盒微量法MTCH2 线粒体载体同源蛋白2抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-human IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗人IgM 规格: 0.1ml
phospho-Ep300 (Ser1834) 磷酸化转录接蛋白EP300抗体 规格: 0.1mlphospho-B-Raf (Ser446) 磷酸化B-Raf抗体 规格: 0.1ml
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser305) 磷酸化雌激素受体α抗体 规格: 0.1mlRobo 轴突导向受体抗体 规格: 0.1ml
TM9SF4 跨膜蛋白9家族成员4抗体 规格: 0.2mlHPV16 L2 人瘤毒16型L2抗体 规格: 0.2ml
C3c/Complement fragment 3c 补体片段C3c抗体 规格: 0.2mlMYRIP/SLAC2-C MYRIP蛋白抗体 规格: 0.2ml
CYP8A1/PTGIS 前列环素合成抗体 规格: 0.1mlPhospho-Jak3 (Tyr980/981) 磷酸化蛋白酪激JAK-3抗体 规格: 0.1ml
beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉样肽1-40(C端)抗体 规格: 0.1mlC19orf46 19号染色体开放阅读框46抗体 规格: 0.2ml
Mesothelin 间皮素抗体 规格: 0.1mlNEK7 丝/苏蛋白激Nek7抗体 规格: 0.2ml
GSK3 alpha 葡萄糖合成激3α抗体 规格: 0.1mlG protein beta subunit GI G蛋白/鸟苷酸结合蛋白抗体 规格: 0.2ml
Phospho-CDK9 (Thr29) 磷酸化周期素依赖性激9抗体 规格: 0.1mlPhospho-Bad(Ser134) 磷酸化相关死亡促进因子抗体 规格: 0.1ml
Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的小鼠抗牛IgG 规格: 0.1mlDCAF13 DCAF13蛋白抗体 规格: 0.2ml
PG-C/Pepsinogen 2 胃蛋白原C抗体 规格: 0.1mlCK19 细胞角蛋白19抗体 规格: 0.1ml
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