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β半乳糖苷酶(βGAL)测试盒可见分光光度

简要描述:β半乳糖苷酶(βGAL)测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:葡萄糖酸盐-双岐杆菌鉴定 英文名称: 产品规格:20支 双岐杆菌生化试验无糖对照 英文名称: 产品规格:20支 醇发酵管-O157菌生化鉴定 英文名称: 产品规格:20支 纤维二糖-O157菌生化鉴定 英文名称: 产品规格:20支

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-26
  • 访  问  量:327

详细介绍

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:β半乳糖苷酶(βGAL)测试盒可见分光光度

产品规格:50管/24样

检测方法:可见分光光度法

产品货号:BK-01S6750

产品分类:糖代谢系列
商品介绍:

测定意义:

β-GAL(EC 3.2.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能够催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷键水解,此外还具有转半乳糖苷的作用。β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量,还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解,释放自由的半乳糖。

测定原理:

β-GAL分解对-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。

自备用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

250mL Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.6   Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.6   常温保存

10mL 溶液,50mg/mL Spectinomycin Solution 4℃避光干燥保存

2 ug pQE-30LacIq pQE-30LacIq 低温运输,-20℃保存

3%NaCl阿拉伯糖  20支

250mL MES Buffer,1.0M,pH7.5   MES Buffer,1.0M,pH7.5   常温保存

产毒培养基 Toxin-Producing Medium 250g

5g α- 酮戊二酸 α-Ketoglutaric Acid 4℃保存

50T 轮状病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

5mL 口腔角质细胞生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

100mL AMPD Buffer,0.2M,pH8.0  AMPD Buffer,0.2M,pH8.0  常温保存

1000mL 超快核酸银染试剂盒 Rapid Silver Stain for Nucleic Acid 常温

β半乳糖苷酶(βGAL)测试盒可见分光光度Rabbit Anti-Bov IgG/Cy5  Cy5标记的兔抗牛IgG  规格: 0.1ml

BNP(H1G3)  人脑钠素单克隆抗体 规格: 0.1ml

AMPD3  红细胞苷脱氨3抗体 规格: 0.2ml

synaptotagmin-2  突触结合蛋白相关基因2抗体 规格: 0.1ml

CDK8  周期素依赖性激8抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的兔抗牛IgG  规格: 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/FITC  FITC标记的驴抗羊IgG 规格: 0.3ml

MARK2  丝/苏蛋白激MARK2抗体 规格: 0.2ml

FAM70A  FAM70A蛋白抗体 规格: 0.2ml

Goat Anti-Chicken IgG  羊抗鸡IgG 规格: 1mg

NDUFS3  线粒体复合物NDUFS3蛋白抗体 规格: 0.2ml

Band3/CD233  红细胞阴离子交换蛋白1抗体 规格: 0.2ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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