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产品名称:

α半乳糖苷酶(αGAL)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 97
更新时间: 2022-05-30
描述:α半乳糖苷酶(αGAL)测试盒微量法公司正在出售的产品:1%NaCl甘露糖 英文名称: 产品规格:20支 氨基酸脱羧对照 英文名称: 产品规格:20支 1%NaCl蔗糖 英文名称: 产品规格:20支 鸟脱羧肉汤 英文名称: 产品规格:20支

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6747

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

α半乳糖苷酶(αGAL)测试盒微量法

100管/48样

微量法

BK-01S6747

商品介绍:

测定意义:

α-GAL (EC 3.2.1.22)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能专一地催化α半乳糖苷键的水解,主要参与棉子糖、水苏糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL对于植物种子的萌发至关重要,种子萌发初期,其催化产生的D-半乳糖通过糖酵解途径迅速转化和消耗,为种子的萌发提供最初的能量来源,后期则主要参与细胞壁储藏多糖水解。

测定原理:

α-GAL分解对-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算α-GAL活性。

自备用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

100mL 三 TFA(Trifluoroacetic Acid) 室温保存

Fraser(FB2)添加剂 Fraser Supplement 5ml*2

1 管 JM101大肠杆菌 JM101 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRSV-rev pRSV-rev 低温运输,-20℃保存

100mL 冷冻型血液RNA保存液  常温

2 ug pcDNA3.1/Myc-His C pcDNA3.1/Myc-His C 低温运输,-20℃保存

YM培养基 YM Medium 250g

500mL 甲醇 Methanol 室温密封保存

50T 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)核酸检测试剂盒(RT-PCR)  低温运输,-20℃保存

1 mg BCECF AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

BETA-SSA琼脂 BETA-SSA Agar 250g

α半乳糖苷酶(αGAL)测试盒微量法Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Bio  标记的兔抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlDOK3  对接蛋白3抗体 规格: 0.2ml

LRFN2/SALM1  神经突触粘附样分子1抗体 规格: 0.2mlTHAP1  核凋亡因子THAP1抗体 规格: 0.2ml

NUDEL/NDEL1  中心粒蛋白Nudel抗体 规格: 0.2mlPDIA2/PDI  蛋白质二硫键异构抗体 规格: 0.2ml

PGRMC  孕激素受体膜相关元件抗体 规格: 0.2mlSCN10A/NAV1.8  钠通道蛋白10α抗体 规格: 0.2ml

CD158e  NK细胞抑制性受体3DL1抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-chicken IgM/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗鸡IgM 规格: 0.1ml

C10orf93  10号染色体开放阅读框93抗体 规格: 0.2mlCAMK2D/CaMKII delta  钙/钙调素依赖蛋白激2D(CaMKIIδ) 规格: 0.2ml

EME1  减数分裂内切EME1抗体 规格: 0.2mlCDC123/C10orf7  细胞分裂周期蛋白CDC123抗体 规格: 0.2ml

HSD3B1  滋养层细胞抗原3β-HSD抗体 规格: 0.1mlGlutamine PRPP amidotransferase  谷磷酸核糖基焦磷酸酰胺基转移 规格: 0.2ml

PIWIL4  piwi样4蛋白抗体 规格: 0.1ml

Histone H1  组蛋白H1抗体 规格: 0.1ml

CXorf36  脱羧蛋白体36抗体 规格: 0.2ml

GFP  绿色荧光蛋白抗体 规格: 0.1ml

 


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