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还原糖含量测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 95
更新时间: 2022-05-30
描述:还原糖含量测试盒微量法公司正在出售的产品:1/4MS培养基(不含琼脂和蔗糖) 英文名称:1/4 MS Medium(without agar or sucrose) 产品规格:250g N6培养基(不含琼脂和蔗糖) 英文名称:N6 Medium 产品规格:250g B5培养基(不含琼脂和蔗糖) 英文名称:B5 Medium(without agar or sucrose) 产品规格:250g 1/

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6737

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

还原糖含量测试盒微量法

100管/48样

微量法

BK-01S6737

商品介绍:

测定意义:

还原糖广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。植物体内的还原糖主要包括葡萄糖、果糖和麦芽糖等,是最常见的单糖和双糖,其中葡萄糖和果糖不仅是呼吸作用的主要底物,也是进一步合成蔗糖、淀粉和纤维素的底物。

测定原理:

加热促进碱性溶液中3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖生成棕红色氨基化合物,在540nm有特征吸收峰;在一定的浓度范围内,还原糖含量与540nm吸光度成线性关系,根据标准曲线,即可求出样品中还原糖的量。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

2 ug pSP64 pSP64 低温运输,-20℃保存

400U RNase抑制剂(人源) Human RNase Inhibitor -20℃保存

2 ug pCMV-SPORT6 PPP2R3A pCMV-SPORT6 PPP2R3A 低温运输,-20℃保存

Preston肉汤基础 Preston Broth Base 250g

25mg 多聚 -L- 赖 (7-15 万 ) Poly-L-Lysine -20℃保存

50T 人注意缺陷多巴胺载脂蛋白基因多态性PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

5 g L-Arginine(NO前体) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250ml E. Coli Lysis Buffer  E. Coli Lysis Buffer  常温保存

100mL SSPE溶液,20× SSPE, 20× 常温

2 ug PINDCSPD PINDCSPD 低温运输,-20℃保存

亚碲酸钾血琼脂基础 Potassium Tellurite Blood Agar Base 250g

还原糖含量测试盒微量法GIMAP7  GTPIMAP家族成员7抗体 规格: 0.2mlC2orf68  2号染色体开放阅读框68抗体 规格: 0.2ml

CCDC70  卷曲螺旋结构域蛋白70抗体 规格: 0.2mlTRIM29/ATDC  共济失调毛细管扩张症D相关蛋白抗体 规格: 0.2ml

PSGD/HOXB13  同源盒蛋白HOXB13抗体 规格: 0.2mlphospho-HDAC7 (Ser318)  磷酸化组蛋白去乙酰化7抗体 规格: 0.1ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的小鼠抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlIL-13Ra1  白细胞介素-13受体a1抗体 规格: 0.1ml

procollagen type IIA  Ⅱ型胶原α1抗体 规格: 0.2mlDDB1  DNA损伤结合蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5  Cy5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 规格: 0.1mlSkp2/skp2 p45  细胞S期激相关蛋白2抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgM/RBITC  罗丹明标记的兔抗人IgM 规格: 0.3mlphospho-HRH1(Ser398)  磷酸化组胺受体H1抗体 规格: 0.1ml

TRAF1  瘤坏死因子受体相关因子1抗体 规格: 0.2mlDog IgM/Cy3  Cy3标记的兔抗犬IgM抗体 规格: 0.1ml

ANKRD50  锚蛋白重复结构域蛋白50抗体 规格: 0.2mlMouse Anti-Goat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的小鼠抗羊IgG 规格: 0.1ml

NUDC  细胞核分离基因C蛋白抗体 规格: 0.2mlPhospho-FGFR1 (Tyr307)  磷酸化碱性成纤维细胞生因子受体1抗体 规格: 0.1ml

HRH3/GPCR97  组织胺H3受体抗体 规格: 0.1mlPCDHB4  原钙粘蛋白β4抗体 规格: 0.2ml

Phospho-cdc25A (Ser178)  磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体 规格: 0.1ml

 


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