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产品名称:

葡萄糖脱氢酶(GCDH)测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 67
更新时间: 2022-05-30
描述:葡萄糖脱氢酶(GCDH)测试盒微量法公司正在出售的产品:葡萄糖 英文名称: 产品规格:20支 麦芽糖 英文名称: 产品规格:20支 无盐胰胨水 英文名称: 产品规格:20支 7%NaCl胰胨水 英文名称: 产品规格:20支

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6765

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

葡萄糖脱氢酶(GCDH)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6765

商品介绍:

测定意义:

GCDHEC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H,大量存在于高等动物的肝脏和弱氧化醋杆菌中。在低聚果糖生产中使用GCDH,不仅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量,而且生成的葡萄糖酸与钙离子结合生成的是一种理

想的补钙制剂。因而,GCDH已成为制备高含量低聚果糖的理想用酶。

测定原理:

GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH,在340nm下测定NADH上升速率,即可反映GCDH活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

MS培养基 MS Medium 250g

1瓶 SW1990细胞株 SW1990 低温运输和保存

XLD培养基 Xylose Lysine Desoxycholate Medium 250g

5g 赤藓红 B 二钠盐 Erythrosin B Disodium Salt  室温干燥避光保存

50T 肺炎链球菌PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

1瓶 LOVO细胞株 LOVO 低温运输和保存

2 ug SD1211- 3 SD1211- 3 低温运输,-20℃保存

50mL 内毒素清除专用亲和介质 Endotoxin Removal Resin 4℃保存

2 ug pET-42b(+)   pET-42b(+)   低温运输,-20℃保存

马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)(新药典)  250g

1瓶 AsPC-1细胞株 AsPC-1 低温运输和保存

葡萄糖脱氢酶(GCDH)测试盒微量法Integrin Alpha V + Beta1  整合素αVβ1抗体 规格: 0.1ml

phospho-JunD(Ser255)  磷酸化活化蛋白激D抗体 规格: 0.1ml

Mouse Anti-rat IgG/AP  碱性磷酸(AP)标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml

EpCAM/CD326  上皮细胞粘附分子抗体 规格: 0.1ml

Phospho-Cas (Tyr165)  磷酸化细胞凋亡敏性基因 规格: 0.1ml

NDUFA10  NADH氧化还原辅10抗体 规格: 0.2ml

CENPA  着丝粒蛋白A 规格: 0.1mlFactor H  补体因子H抗体 规格: 0.2ml

VANGL2  神经管畸形相关蛋白VANGL2抗体 规格: 0.2mlPhospho-GRM2/GLUR2(Tyr876)  磷酸化促代谢型谷受体2抗体 规格: 0.1ml

phospho-CTNNBIP1 (Ser36)  磷酸化β链接素相互作用蛋白1抗体 规格: 0.1mlCKMT2  肌酸磷酸激2抗体 规格: 0.2ml

GCMA/GCM1  绒毛膜特异性转录因子GCMa抗体 规格: 0.2mlConnexin-32  间隙连接蛋白32抗体 规格: 0.1ml

APOA4  载脂蛋白A4抗体 规格: 0.2mlRRAGA  RAS相关GTP结合蛋白A抗体 规格: 0.2ml

SLAMF9/CD2F-10  CD2F-10抗体 规格: 0.2mlBAALC  脑和急性白胞浆蛋白抗体 规格: 0.2ml

 


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