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产品名称:

组织无机磷含量测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 105
更新时间: 2022-05-30
描述:组织无机磷含量测试盒微量法公司正在出售的产品:兔血浆 进口、国产Rabbit Plasma用于菌凝固试验0.5ml*20DNA琼脂 进口、国产DNase Agar用于核糖核酸检测1007.5%氯化钠肉汤 进口、国产7.5% Sodium Chloride Broth用于菌的增菌培养(GB标准)250普通肉汤 进口、国产Broth Medium用于菌的增菌培养(SN标准)250

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6802

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:组织无机磷含量测试盒微量法

产品规格:100管/96样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6802

产品分类:离子系列
商品介绍:

测定意义:

无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等,此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。

测定原理:

钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量。

自备仪器和用品:

离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

2 ug pGL4.18[luc2P/Neo] pGL4.18[luc2P/Neo] 低温运输,-20℃保存

抗生素检定 8 号  250g

1瓶 FaDu细胞株 FaDu 低温运输和保存

225ml FB1增菌液均质袋 FB1 Broth 10个/包

2000U 绿豆核酸 Mung Bean Nuclease  -20℃保存

500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH8.0   Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH8.0   常温保存

1Mu G钾盐溶液,200mg/mL Penicillin G Potassium  室温保存,溶液需-20℃保存

2 ug pQCXIH pQCXIH 低温运输,-20℃保存

麦芽糖  20支

2 ug pCAT3 control pCAT3 control 低温运输,-20℃保存

3%NaCl碱性蛋白胨水  9ml*10支

组织无机磷含量测试盒微量法TRIAD3  锌指蛋白抑制NFκB蛋白抗体 规格: 0.2mlPhospho-MYL(Ser19)  磷酸化肌球蛋白轻链2抗体 规格: 0.1ml

RUBISCO  核酮糖1,5二磷酸羧化抗体 规格: 0.1mlGalactose kinase/GALK1  半糖激1抗体 规格: 0.2ml

Phospho-HSP27(Ser78)  磷酸化热休克蛋白27抗体 规格: 0.1ml

DDAH-II  双甲基水解2抗体 规格: 0.2ml

Adiponectin Receptor 1  脂联素受体1抗体 0.2ml

Fast skeletal Myosin/MRLC2  骨骼肌肌球蛋白轻链2抗体 规格: 0.1ml

DDX4/MVH  DDX4抗体 规格: 0.1ml

FSTL5  卵泡抑素相关蛋白5抗体 规格: 0.2ml

phospho-MAP4(Ser1073)  磷酸化微管相关蛋白4抗体 规格: 0.1ml

GADD153/CHOP/DDIT3  GADD153抗体 规格: 0.1ml

Phospho-CDK2 (Thr14)  磷酸化周期素依赖性激2抗体 规格: 0.1ml

TSPAN15/NET-7  四分子交联体15抗体(四旋蛋白) 规格: 0.2ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

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